Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Н епрямой метод РИФ
Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами Рисунок 53. антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся с антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе (Рис2).
В иммунфлюоресцентном методе применяются специальные люминисцентные микроскопы.
Некоторые вещества под воздействием энергии возбуждения способны излучать свечение — это называется явлением люминесценции. Для исследования объектов, обладающих данным свойством, используют люминесцентные микроскопы — они находят применение в таких областях наук, как биология, цитология, генетика, иммунология (иммунохимические, иммунологические, иммуноморфологические и иммуногенетические анализы) и многих других для исследования различных люминесцирующих материалов. Являются незаменимыми при ранней диагностике различных инфекций антигенного состава, например, вирусных и бактериальных.
Среди преимуществ люминесцентных микроскопов стоит отметить:

• 
  возможность наблюдения как прозрачных, так и непрозрачных веществ, а также поверхностей темных объектов;
  

Рис 54. Получение контрастного изображения исследуемого объекта на темном фоне. 
Применяется в различных отраслях науки, например, в биологии.
Принцип действия люминесцентных микроскопов заключается в получении изображения посредством светового потока свечения самого объекта исследования. Свет, прошедший сквозь возбуждающий светофильтр в устройстве микроскопа, вызывает свечение объекта, данный световой поток затем проходит через запирающий светофильтр, где отсекает возбуждающее излучение, и остается только люминесцентный, то есть световой поток свечения объекта.
В настоящее время разработаны разные модификации люминесцентных микроскопов, среди них, широко применяется люминесцентный микроскоп «Альтами»

Рисунок 55. Люминесцентный микроскоп Рисунок5. Люминесцентный микроскоп

(Альтами ЛЮМ 1 LED) (Альтами ЛЮМ 11 LED)