Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Постановка реакции микропреципитации при сифилисе.
Эта реакция ставится с кардиолипидным антигеном. Суть метода состоит в том, что у пациентов с сифилисом при добавлении кардиолипидного антигена в сыворотку крови или плазмы образуется преципитат (комплекс антигена + аутоантитела) в нижней части пробирки и осаждается на дне в виде белого осадка.


Техника постановки
Нативную плазму или инактивированную сыворотку пипеткой или пипеточным дозатором перено­сят в лунки планшета для иммунологических реакций по 3 капли. Затем добавляют эмульсию антигена по 1 капле и перемешивают, осторожно покачивая планшет в руках в течение 5 мин. Затем в каждую лунку добавляют по 3 капли натрия хлорида раствора 0,9 % и оставляют на 5 мин. Результаты реакции можно увидеть невооруженным глазом. На лунках планшета образуются хлопьевидные осадки больших размеров (4+,3+), средних и мелких размеров (2+,1+). При отрицательной реакции преципитации не происходит. Обязательно одновременно ставить реакцию с отрицательной контрольной сывороткой.
Реакции микропреципитации также можно применить для определения количества антител в сыворотке крови больного для динамики эффективности лечения. Тирт АТ в плазме выше, чем в сыворотке крови. За рубежом применяются аналоги реакции микропреципитации, если АТ определяются в сыворотке крови, то называется VDRL (Veneral disease research laboratory), а если в плазме RPR (Rapid plasma reagin).


Лабораторная работа
Постановка реакции кольцетермопреципитации Асколи.
Цель: научить диагностике инфекции (сибирская язва) при помощи реакции термопреципитации Асколи
Необходимые ингредиенты: преципитирующая сыворотка (АТ) (1 пробирка), экстрат (вытяжка из кожи), полученный кипячением кожи животного, подозреваемого на сибирскую язву (АГ) , специальные для реакции преципитации пробирки, штатив, пипетки, резиновая груша, физ.раствор

Ход работы (шаги).

№	Выполняемые работы	Не выполнено (балл)	Выполнено полностью (балл)
1	В первую специальную тонкую пробирку берут сыворотку против антигена сибирской язвы.	0	10
2	Во вторую пробирку берут физиологический раствор.	0	10
3	Первую пробирку держат под углом 40^0 и осторожно пипеткой Пастера по стенке пробирки добавлют экстракт (АГ)	0	25
4	Таким же образом экстрат из кожи добавляю во вторую контрольную пробирку	0	25
5	Обе пробирки осторожно приводят в вертикальное положение.	0	10
6	При соответствии антигена и антитела в сыворотке образуется между ними беловатое кольцо преципитации.	0	10
7	Во второй контрольной пробирке кольцо не образуется, полученные результаты изучаются, записываются в тетрадь и рисуют схему.	0	10
	Всего:	0	100