Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Тема лабораторной работы № 13
“СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. РЕАКЦИИ ПРЕЦИПИТАЦИИ И ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ.”
Цель работы
Ознакомление с методами реакций преципитации ииммунофлюоресценции, применяемых для серологической диагностики инфекционных заболеваний.
Педагогические задачи
- объяснить значение методов реакций преципитации и иммунофлюоресценции, применяемых для серологической диагностики инфекционных заболеваний.
- указать на значение реакций преципитации и иммунофлюоресценции в диагностике особо опасных инфекционных заболеваний.
Результаты лабораторной работы
Студент должен знать:
- представление о реакциях преципитации, применяемых для серологической диагностики инфекционных заболеваний
- сущность и механизм реакций преципитации и иммунофлюоресценции в диагностике особо опасных инфекционных заболеваний.


Студент должен выполнить
- постановку реакции преципитации
- постановку иммунофлюоресценции в диагностике особо опасных инфекционных заболеваний
- интерпретацию результатов реакции и применение в практиктической деятельности.


Теоретическая часть
Метод иммунфлюоресценции. Широко используется на практике для диагностики возбудителей инфекционных заболеваний в патологических материалах, инфицированных предметах, тканях животных и
к леточных культурах с помощью флюоресцирующих антител (сывороток). И, наоборот, выявление антител против возбудителя заболеваний в сыворотке крови с помощью меченных антиантител. Метод иммунфлюоресценции является методом экспресс диагностики и своей чувствительностью и специфичностью не отличается от других серологических реакций. Эти методы сочетают флуоресцентные красители, такие как флуоресцеин изотиоцианат (ДИТЦ) с антителами, чтобы сделать их светящимися под воздействием ультрафиолетового света. Подготовка флюоресцирующих сывороток основана на химическом связывании с белками сыворотки, но при этом не нарушается иммунологическая специфичность белков сыворотки при воздействием флюорохромов. Метод иммунфлюоресценции также называется реакцией Кунса.
Рисунок 52. Различают разновидности метода прямой и непрямой.
Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета. Недостаток реакции заключается в том, что для определения каждого микроба или вируса нужно готовить полный набор специальных сывороток (Рис 1).