Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Методические указания
Постанока реакции развернутой агглютинации. Схема проведения реакции на сыворотке крови больного приведено в таблице. Сначало готовят основной раствор сыворотки, при этом титр сывороткисостовляет соотношение 1:100, 1:200, 1:400, 1: 800, для чего берут 1 мл основного раствора добавляют в 1-ю пробирку, с 1 во 2 пробирку и т.д.
Чтобы объемы были равными с последней пробирки 1 мл изотонического раствора отливают в дез.раствор. Во все пробирки с разведенной сывороткой и в контрольную добавляют по 2-3 капли (0,15 мл), суспензии бактерии (диагностикум), содержащий в 1 мл 3млярд микробных телец. Пробирки тщательно взбалтываются и помещаются в термостат на 2 часа при температуре 37°, затем хранят в течение сутки при комнатной температуре.
Таблица1.
Схема реакции развернутой агглютинации

№	Ингредиенты	Пробирки
		1	2	3	4	5	6
		Разведение
		1:100	1:200	1:400	1:800	Конрол (Аг)	Конрол (сыворотка)
1	Изотонический раствор хлорида натрия	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
2	Сыворотка крови (больного) разведенная в соотношении 1:10	0,5	-	-	-	-	0,5 (1:10)
3	Диагностикум (1-2 млярд. раствор микроба).	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15	-

После этого рассматривают результат реакции со жгутиковым антигеном. Через 18-20 часов рассматривают результаты с соматическим антигеном. Результаты рассматриваются невооруженным глазом или с агглютиноскопом.

Пробирки осторожно встряхивают. Если реакция положительная, то образуется хлопьевидный осадок (Н-агглютинация) или может быть зернистым (О-агглютинация).
Ход ирезультаты реакции агглютинации определяются четырьмя положительными знаками. При четырех положительных знаках (++++)в пробирке все антигены осаждаются и раствор становится прозрачным. При (+++)-имеется осадок и жидкость мутноватая. При (++) половина антигенов осаждаются и жидкость мутная. Если четыре или три положительных знаков, то реакция считается положительной. А если определяются два положительных знака или минус, то отрицательная.

51-rasim. Byum oynasida agglyutinasti reaksiyasini qo’yish sxemasi