Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Тема лабораторной работы №12
«СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ».
Цель работы.
Ознакомление методами серологической диагностики возбудителей инфекционных заболеваний и сероидентификации бактерий.
Педагогические задачи
- Напомнить о строении О-соматического, Н-жгутикового, К-капсульного антигенов, их свойства, значение в сероидентификации;
- Дать понятие о методах сероидентификации выделенных культур бактерий;
-объяснитьзначение серодиагностики в определении возбудителя инфекционных заболеваний.
Результаты лабораторной работы
-студент должен знать:
-строение О-соматического, Н-жгутикового, К-капсульного антигенов, их свойства, значение в сероидентификации;
- механизмы реакции антиген+антитела, их применение на практике и интерпретацию результатов реакции
Студент должен выполнить:
-определение О-соматического, Н-жгутикового, К-капсульного антигенов с помощью серологических реакций
-поставить развернутую реакцию Видаля и сероидентификацию выделенной чистой культуры бактерии на предметном стекле.
Теоретическая часть
Антигены. На протяжении жизни человека,выработанное узнавание и ответнаяспецифическая реакция на генетически чужеродное вещество, называется приобретенным иммунитетом. Антигены- естественные и искусственные, синтетические вещества (белки, полисахариды и др), при введении в организм повышают иммунокомпетентную активность лимфоидных клеток, при этом возникает состояние толерантности (неспецифичность) или специфический иммунный ответ. Антигены в своем составе содержат факторы генетической чужеродности (анти-против, ген-вид).
Антигены различают по следующим свойствам:
1.Антигеность- способность антигена образовывать иммунитет, или его сила. Эта способность антигенов в основном относится к антигенам микроорганизмов. Например, возбудитель дизентерии имеет высокую степень антигенной способности, но его иммунногенная способность слабая, поэтому он не может образовывать длительный иммунитет, и, наоборот, брюшной тиф обладает высокими антигенными и иммунногенными свойствами, поэтому применяется в вакцинации.
2.Специфичность – основное свойство антигена, этим свойством антигены различаются друг от друга. К специфическим видам антигенов относятся- видовая, групповая, функциональная специфичности, стадийная, гаптеновая, патологическая специфичность и антигенная мимикрия.
4.Коллоидные свойства антигена – (состав и растворимость) антигены хорошо растворяются при введении в организм в коллоидном виде.
Антигенными свойствами обладают белки, микроорганизмы, продукты их жизнедеятельности (токсины), яды змей, скорпионов, вещества, встречающиеся в составе растений (рицин, абрия), элементы клеток и тканей, чужеродные вещества и др.
Антигены бывают полноценными и неполноценными. Полноценные антигены-(белки, полисахариды, липопротеины, комплексные соединения) при введении в организм, на них образуются специфические антитела и активируют иммуннокомпетентные лимфоидные клетки.
Неполноценные антигены – являются гаптенами, при введении в организм не образуются специфические антитела и лимфоциты с повышенной чувствительностью. К гаптенам относятся жиры, низкомолекулярные органические соединения, но если к этим антигенам присоединить белки или ферменты, то они становятся полноценными. Иммунный ответ вырабатывается против гаптенов (специфичность к гаптенам). Гаптен, связанный с молекулой белка, выполняет функцию переносчика и называется «шлепером»(с нем. Shleper - наблюдает).
Специфичностьантигена зависит от первичного строения аминокислот, от их состава, последовательности, от количества детерминант, присоединенных к аминокислоте.
Детерминанты, расположенные на поверхности аминокислот придают ей определенную форму (конфигурацию) пространственного соединения и свойство полярности. Носят на своей поверхности один заряд элктрона. Количество детерминант определяет валентность, качество (антигенность), силу (иммуногенность) белка. Например, альбумин в составе сыворотки крови человека содержит 6 групп детерминант. В составе белка глобулина содержится 8 групп детерминант. Поэтому белок иммуноглобулина обладает большим антигенным и иммуногенным свойством по сравнению с альбумином.