Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Постановка реакции агглютинации на предметном стекле
Данная реакция ставится для определения вида и серогрупп микроорганизмов. Для этого 1-2 капли агглютинирующей сыворотки при помощипипетки Пастера капаем на предметное стекло, для контроля берем 1-2 капли изотонического раствора хлорида натрия, затем бактериологической петлей берется культура микроба и смешивается на предметном стекле со специфической сывороткой. Результат реакции смотрим через 3-10 минут. При положительной реакции на поверхности предметного стекла образуется агломерат. А антиген, исследуемый с физиологическим раствором и контрольной сывороткой, на предметном стекле не дает осадка, т.е. положительной реакции.
Лабораторная работа. Постановка развернутой реакции агглютинации.
Цель: с помощью реакции Видаля определение наличия и количества неизвестных антител в сыворотке крови больного с помощью известного антигена.
Необходимое оборудование: стерильные пробирки, сыворотка крови (больного), пипетки, стерильный физиологический раствор (по 3 набора), спирт 96⁰ , агглютиноскоп, эксикатор с дез.раствором (по одному). Диагностикумы брюшного тифа, паратифов Аи В (3 пробирки по 5 мл)
Ход работы ( по шагам)

№	Выполняемые этапы		Схема выполнения	Выполнил (балл)
1	В штатив ставятся по 6 пробирок в 3 ряда			10
2	В 1 пробирку налить 4,9 мл физиологического раствора. В остальные пробирки при помощи стерильной пипетки - по 1 мл физ. раствора			10
3	В 1 пробирку капаем 0,1 мл сыворотки крови больного, образуется рабочее разведение (1:50)			15
4	При помощи пипетки с 1 пробирки берем 1,0 мл жидкости переливаем во 2 пробирку (1:100),со 2 пробирки добавляем в 3. пробиркуи т.д титр до титра 1:800			15
5	С 5 пробирки берем 1 мл жидкости идобавляем в дез.раствор. Последняя пробирка для контроля диагностикума			10
6	Во все пробирки, кроме 6, добавляем 0,1 мл антигена (диагностикума)(брюшнлй тиф-первый ряд, паратиф А- во 2 ряд, паратиф В – в 3 ряд пробирок)			15
7	Штатив с пробирками ставится в термостат на 24 часа при температуре 37ºС			5
8	На следующий день учитываются результаты реакции с помощью агглютиноскопа. При положительной реакции в пробирках образуется хлопьевидный осадок. Интенсивность реакции определяется 4-мя(+), 3-мя (+)-положительная, 2-мя(+)-отрицательная. В контрольной пробирке агглютинации не наблюдается			15
9	Диагностический титр реакции агглютинации (1:200 и выше). Результаты записываются в тетради.			5
Итого:		0		100

Приложение: Чтобы результат агглютинации был правильными, диагностикумы не должны быть просроченными. Для этого смотрят на дату производства диагностикума на ампуле. Диагностикум при встряхивании должен быть однородным и прозрачным. Кроме этого, в коробке, произведенного диагностикума имеется сыворотка крови больного, в качестве контроля с ним ставится реакция. Если все вышеуказанное соблюдено, то диагностикум можно применять на практике.