Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Работа 12. Определение общего азота 
мочи колориметрическим методом 
Для определения общего азота мочи сначала проводят сжигание органиче­ 
ских веществ мочи с концентрированной серной кислотой. После сжигания 
(минерализации) органических веществ мочи концентрированной серной ки­ 
слотой азот в виде аммиака всех исследуемых фракций связывается с серной 
кислотой, образуя сульфат аммония. Колориметрическое определение общего 
азота основано на том, что аммиак сульфата аммония образует с реактивом 
Несслера желто-оранжевое окрашивание при pH 12,0: 
2K
2
HgI
4
+ 3КОН + NH
3
→ Hg
2
ONH
2
I + 7KI + 2Н
2
O 
Реактив Несслера 
Йодит меркураммония 
Интенсивность окрашивания раствора прямо пропорциональна концентра­ 
ции аммиака, а следовательно, и азота в моче. 
48 

---

Реактивы и оборудование: 
Серная кислота (конц.); гидроксид натрия (50 %); стандартный­ раствор 
сульфата аммония: химически чистый сульфат аммония (массой 0,943 г) 
рас-творяют в 1 л воды (1 мл раствора содержит 0,2 мг азота); реактив­ 
Heсслepa: 10 г йодида калия растворяют в 15 мл воды, добавляют 15 г 
йодида­ ртути (II), тщательно перемешивают и приливают 80 мл 50 % 
раствора щелочи (не со-держащей карбонатов). Перемешивают и общий 
объем доводят охлажден-ной прокипяченной дистиллированной водой до 
500 мл. Оставляют на сутки, после чего фильтруют через стеклянную вату. 
Раствор должен быть про-зрачным (хранить в темной склянке с притертой 
пробкой); моча; перекись водорода; лакмусовая бумага. 
Колбы Кьельдаля, пробирки, штативы для пробирок, пипетки на 1 и 10 мл, 
мерные цилиндры на 20 мл, электроплитки, песчаные бани, фотоэлектро­­ 
колориметр.