Kafedrasi “biotexnologiya” fanidan o‘quv-uslubiy majmua

Tadqiqotobekti:Bu ishda Saccharomyces cerevisiae achitqisining invertaza fermentidan foydalanildi.
Qo’llanilgan tashuvchilar: KAAK –Kokos asosida aktivlangan ko’mir, OAAK-oqqayin asosida aktivlangan ko’mir, USVR- yuqori reaksiya kuchga ega bo’lgan uglerod aralashmasi).
Asboblar: Sentrifuga K-24D (―VEB MLW Medizintechnik‖, GDR), magnit aralashtirgich MM5, kalorimetrikizlanishlar FEK-M (Загорский оптико- механический завод, СССР,) olib borilgan, ultratermostat TYPE LV-644 («MTA KUTESZ», Vengriya).
Reagentlar: etanol, n-butanol, izobutanol, atsetonitril, xlorid kislota, sirka kislota, qo’sh asosli kaliy fosfat, glyukoza, fruktoza, saxaroza, mochevina, bura, bor kislotasi, dimetilformamid (―Реахи, Россия); Atsetat buferini tayyorlash uchun sirka kislotaning natriyli tuzidan foydalanilgan (―Реахим‖, Россия);
Oqsil miqdorini aniqlash. Louri usuli. Reaktivlar: 1. 0,1 Mli NaOH dan tayyorlangan 2% li Na₂CO₃. 2. Natriy sitratdan tayyorlangan CuSO4 3. 1ml №2-reaktiv bilan 50ml №1- reaktiv aralashmasi tayyorlanadi. 4. Folin reaktivi. Aniqlash usuli: 10- 100mkg oqsildan tashkil topgan tadqiq qilinayotgan eritmani distillangan suv bilan 4 mlgacha yetkazilinadi, 2 ml №3-reaktiv bilan aralashtirilib xona haroratida 10 daqiqa davomida qoldiriladi. So’ngra, 0,2ml Folin reaktivi qo’shilib 30-40 daqiqadan keyin FEK yordamida 750 nm ostida optic zichligi aniqlanadi (LowryO.atal, 1954).
2.2. Invertazani faolligini aniqlash
1% saxaroza va 25–40% (hajmi bo’yicha) etil spirti tutgan pH 5 buferli aralashmasi ikkiga bo’linadi. Biriga 1–2 ml ferment eritma qo’shiladi, ikkinchisiga esa solishtirma namuna (qaynatilib inaktivatsiya qilingan ferment) xuddi shu hajmda qo’shiladi. Faolligini aniqlash bo’yicha tajribalar 25^oC va pH5 li sharoitda olib boriladi. Immobillangan preparatning solishtirma namunasi termostatda 105^o C da 30 daqiqa davomida ushlab turiladi (Oparin A.I., 1955). Invertazani faollik birligi - 1 ml muhitda 1 soat davomida qancha mkg etil- yoki izoamilfruktozidlar hosil bo’lgan miqdori bilan belgilanadi.