Amaliy enzimologiya

 
15-MAVZU: O'SIMLIK URUG'INING LIPAZA FAOLLIGINI 
ANIQLASH 
Lipazning gidrolitik fermenti hayvon va o'simlik to'qimalarida keng tarqalgan. 
Ayniqsa, oshqozon osti bezi, mushak to'qimalari, turli o'simliklarning urug'lari 
mavjud; shuningdek, katta miqdordagi mog'or qo'ziqorinlari va ba'zi bakteriyalar 
hosil qiladi. Lipaz yog 'ajratish reaktsiyasini glitserin va yog' kislotalariga 
katalizlaydi, bu odatda birinchi holatda yog ' kislotasi qoldig'ini ajratish bilan 
boshlanadi: 
Shu bilan birga hosil bo'lgan yog ' kislotalari gidroksidi bilan zararsizlantirilishi 
mumkin. Ma'lum bir vaqt ichida hosil bo'lgan erkin yog ' kislotalarini titrlashga 
ketgan gidroksidi miqdori lipaza faoliyatini baholaydi. Tadqiqot materiallari va 
reagentlar. Pasterizatsiya qilingan sut, oshqozon osti bezi lipazasi, 0,1 h va 0,01 h 
natriy gidroksidi eritmalari, 0,1% fenolftalein eritmasi. 
Qurilmalar. 100 ml, 1 ml, suv hammomi, 37 °s da termostat uchun gradusli 
pipetka uchun konusning idishlari. 50 – 3 tomchi fenolftalein qo'shing va zaif 
pushti binoni uchun 5 n NaOH eritmasi neytrallanadi, shisha idishga 0,1 ml 
pasterizovannogo sut o'lchanadi, 30 S uchun yo'qolib emas.keyin 3-5 daqiqa bir 
shisha 37-40 °C haroratda bilan suv hammomida qo'yish va keyin u (bu vaqtda 
farq) lipaz eritmasi 3 ml qo'shiladi. 
Shishaning tarkibi yaxshilab aralashtiriladi, konusning shishasiga 5 ml 
aralashmasi tanlanadi, musluk suvi oqimi ostida sovutiladi va 0,01 n NaOH 
eritmasi bilan mikropipetadan titrlanadi. Olingan natijalar grafik jihatdan 
ifodalanadi, NaOH eritmasining 0,1 n titrlash uchun yuborilgan miqdorini vertikal 

---

ravishda va gorizontal ravishda inkubatsiya vaqtini kechiktiradi. Formuladan 
foydalanib, mmol / min da a faoliyatini hisoblang: 
A = (V3 – V0) / 0,9. 
O'SIMLIKLAR VA ULARNI QAYTA ISHLASH MAHSULOTLARIDA 
UREAZ FAOLIYATINI ANIQLASH 
Ureaz-gidroliz sinfining fermenti, karbamid gidrolizini karbonat angidrid va 
ammiakga reaktsiyada katalizlaydi: 
Ureaz ba'zi mikroskopik qo'ziqorinlar va bakteriyalar tomonidan sintez qilingan 
soya fasulyalarida mavjud. 
Tadqiqot materiallari va reagentlar. Soya uni, karbamid 2% eritmasi, 
fenolftaleinning 1% eritmasi. Qurilmalar. Sinov probirkalari bilan tripod, 5 ml 
uchun pipetka, suv hammomi. Ta'rif jarayoni. Ikki probirkalari karbamid eritmasi 5 
ml quyiladi va soya un 0,5 g qilish. Ikkinchi probirkada 2 tomchi fenolftalein 
qo'shiladi. Har ikkala probirkaning tarkibi silkitiladi va sinov probirkalari 37– 
40°C haroratda 5-10 daqiqa davomida suv hammomiga joylashtiriladi. Ureaza 
faoliyati ammiakni aniqlash orqali aniqlanadi. Birinchi probirkadagi ammiakning 
ajratilishi xarakterli hid yoki sinov probirkasining ochilishida nam litmus 
qog'ozining ko'kligi bilan aniqlanadi. Ikkinchi probirkaning tarkibi ammiak hosil 
bo'lishi tufayli o'rta reaktsiyaning gidroksidi tomonga o'zgarishi sababli malina 
rangini oladi.