Amaliy enzimologiya

 
11-MAVZU: A. N. BACH VA S. R. ZUBKOVA USULIDA SUT 
KATALAZASIINING FAOLLIGINI ANIQLASH 
Tadqiqot materiallari va reagentlar
.
2 marta (5 ml suv bilan aralashtirilgan 5 ml sut), 1% vodorod peroksidi eritmasi, 
10% sulfat kislota eritmasi, 0,1 n kaliy permanganat eritmasi bilan seyreltilangan 
xom sut.
Asbob uskunalar
. 100 ml uchun kolbalar, 5 va 10 ml li pipetkalar, 1 ml 
lipipetkalar.
Ishning borishi.

---

Ikkita kolbaga 7 ml distillangan suv solinadi. Keyin ulardan birida 1 ml 2 marta 
suyultirilgan xom sut va boshqasiga 1 ml suyultirilgan pishgan sut qo'shiladi. 
So'ngra, har bir idishda katalaza fermenti to'xtatish uchun 3 ml 10% sulfat kislota 
qo'shiladi va nim pushti rang paydo bo’lguncha vodorod peroksidni 0,1 n kaliy 
permanganat eritmasi bilan titrlanadi. Nazorat va tajribali o’rtasidagi titrlash
farqga ko'ra, permanganat miqdori vodorod peroksid fermenti ishtirokida bo'lgan 
miqdorga teng deb olinadi. 
Misol. Sinov namunasini titrlashga 8 ml, tajribaga – 2 ml 0,1 n KMnO4 eritmasi 
sarf bo’lgan. 
1 ml 2 marta suyultilgan sut tarkibidagi katalaza bilan parchalangan vodorod 
peroksid miqdori 8-2 = 6 ml, yoki 6x1,7 = 10,2 mg (1 ml 0,1 n KMnO4 eritmasi 
1,7 mg vodorod peroksidga teng) bo'ladi. 
Shuning uchun, 1 ml xom sut da 30 daqiqada 10,2 x= 20,4 mg vodorod 
peroksidni parchalab qodir katalaza miqdori boladi, degan xulosaga kelinadi. 
 
12-MAVZU: SHIRDON FERMENTI FAOLIYATINI ANIQLASH 
Shirdon fermenti sutni o'rash qobiliyatiga ega va pishloq va pishloq ishlab 
chiqarishda keng qo'llaniladi. Shirdon fermenti faoliyati 1 daqiqa davomida 35 °C 
da 40 g ferment ta'siri ostida kıvrılır sut miqdorini tavsiflovchi shartli birliklar 
bilan ifodalanadi.
Tadqiqot materiallari va reagentlar
. Xom sut, shirdon fermenti (rennin) ning 
1% eritmasi.
Qurilmalar. 100 ml li kolba, 1 ml, Sekundomer, suv hammomi (tajriba davomida 
hammom harorati 35 °C ga teng bo'lishi kerak) bo'yicha pipetka. Ta'rif jarayoni. 
100 ml li kolbaga 50 ml sut quyiladi va harorat 35°C bo’lgan suv hammomida 
qo'yish 3-5 daqiqa orqali sut 0,5 ml 1% eritmasi shirdon qo'shilgan, tez 
aralashtiriladi va Sekundomer o'z ichiga oladi. Sutni stakanning engil chayqalishi 
yoki sutga shisha tayoq bilan tegishi bilan kuzatib boring; gullar va pıhtoqlarning 
ko'rinishi 
pıhtılaşma 
boshlanishini 
ko'rsatadi. 
Sekundomerga 
ko'ra, 
koagulyatsiyaning davomiyligi, ya'ni sutga shirdon fermenti kiritilgunga qadar 
vaqt belgilanadi. Shirdon fermenti faoliyati formula bilan hisoblanadi: 
bu erda x-shartli birliklarda shirdon fermenti faoliyati( u. e.); a-olingan sut 
miqdori, ml; n-sut koagulyatsiyasi davomiyligi, daqiqa. Misol. 50 ml sutga 0,5 ml 

---

1% shirdon eritmasini qo'shing, bu 0,005 ga mos keladi, sut 4 daqiqa davomida 
katlanmış bo'ladi.: 
Shuning uchun, 1 g shirdon fermenti 100 ° s haroratda 40 daqiqa davomida 35 kg 
sutni cho;ktiradi.