Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Реактивы и оборудование: 
Сыворотка крови; резорцин (0,1 % в 95 % этаноле); соляная кислота (10
н.); 
стандартный раствор фруктозы: 0,25 г фруктозы, взятые с точностью 10
–4
г, 
растворяют в 100 мл воды в мерной колбе; хлорная кислота 0,1
н. Фотоэлек­ 
троколориметр­, центрифуга, пробирки, воздушные обратные холодильники, 
колбы мерные на 100 мл, пипетки на 2, 5, 10 мл, микропипетки, термостат. 
Ход работы: 
В центрифужную пробирку вносят
 
0,1 
мл сыворотки крови
,
 
затем
­ 2,5 
мл 
1 
н
.
раствора хлорной кислоты 
(
НС
lO
4
),
перемешивают
,
выдержи
-
вают 
15
минут
,
после чего центрифугируют 
5
минут при 
5 000
об
. / 
мин
. 
125 

---

Берут три пробирки: в первую пробирку вносят 1 мл центрифугата; во вто­ 
рую пробирку — 1 мл смеси, состоящей из 0,1 мл стандартного раствора 
фрук­ тозы и 2,5 мл 1 н. раствора хлорной кислоты; в третью пробирку 
(контроль) — 1 мл смеси, состоящей из 0,1 мл дистиллированной воды и 
2,5 мл 1 н. раствора хлорной кислоты. 
Во все пробирки приливают по 1 мл 0,1 % спиртового раствора резорцина и 
3 мл 10 н. раствора соляной кислоты, закрывают пробками с воздушным 
холодильником и ставят в термостат при 80 °С. Через 8 минут быстро охлажда-ют 
водопроводной водой. Выдерживают при комнатной температуре 5 минут, затем 
измеряют оптическую плотность содержимого пробирок № 1 и 2 против 
контроля­ (пробирка № 3) при 490–510 нм в кювете шириной 1 см (или 0,5 см). 
Содержание фруктозы в сыворотке крови расчитывают по формуле: 
С = Е