Statik biokimyо

23-tajriba. Biuret reaktsiyasi yordamida oqsil miqdorini aniqlash. 
Biuret reaktsiyasi (oqsillarga xos rangli reaktsiyalar betiga qarang) asosida oqsillarni 
miqdoriy jihatdan aniqlash oddiy tajriba bo‘lib, topilishi qiyin bo‘lgan va qimmat turadigan 
reaktivlar talab qilmaydi. Bu usul biologik suyuqliklarda va to‘qima ekstraktlarida oqsilni 
aniqlash uchun qo‘llanishi mumkin.
 
Kerakli asbob va reaktivlar:
 
Qon zardobi yoki gemolimfa, natriy xloridning 1% eritmasi, 
biuret reaktivi, fotoelektrokalorimetr, probirka, 1, 2 va 10 ml darajalangan pipetkalar, natriy 
gidrooksidning 10 % eritmasi, shtativ. 
a)
 
kalibrlash egri chizig‘ini chizish
. 
 
 
Ishning bajarilishi: 
 
 
Buning uchun 1 ml eritmada 1-10 mg gacha oqsil bo‘ladigan uch seriya standart 
eritmalar (2, 4, 6, 8, 10 mg/ml) tayyorlanadi. Bu maqsad uchun kristall oqsil o‘rniga, avvalo 
oqsil miqdori refraktometrik usulda aniqlab olingan qon zardobi yoki gemolimfadan ham 
foydalanish mumkin. Oqsil eritmalarini kerakli kontsentratsiyasigacha suyultirish uchun 1 % Na 
Cl eritmasidan foydalaniladi. 
Birinchi seriya uchun bitta probirka olib unga oqsilning har bir standart eritmasidan 1 ml 
dan quyib, ustiga 8 ml dan biuret reaktividan qo‘shiladi. Uy temperaturasida 30 minut davomida 
qoldirib qo‘yilgandan keyin fotoelektrokalorimetrda 1 sm sig‘imli kyuvetalarda 540 nm 
uzunligida rangning ravshanlik darajasi o‘lchanadi. Kontrol uchun oqsil o‘rniga 1ml distillangan 
suv quyib, qolgan operatsiyalar bir xilda olib boriladi. Ќar safar yangi standart oqsil eritmalari 
olinib, aniqlash uch marta takrorlanadi. Olingan ekstinktsiya qiymatlariga qarab kalibrlash egri 
chizig‘i chiziladi.
b)
 
oqsil miqdorini aniqlash.