С. А. Эгамбердиева молекуляр

 

---

83 
 
Расм.12.10. ДНКни праймер-
воситали сайр усули билан 
секвенирлаш. 1. ДНК занжири 
синтезини плазмиданинг киритма 
яқинида жойлашган соҳасига 
комплементар праймер (Р1) 
ёрдамида инициациялаш. 2. 
Клонланган ДНКнинг узунлиги 
250-300 нуклеотиддан иборат 
фрагментини секвенирлаш. 3. 
Узунлиги тахминан 20 
нуклеотиддан иборат секвенирлаб 
бўлинган охирги соҳасига 
комплементар бўлган иккинчи 
праймерни танлаб олиш. 4. 
Клонланган ДНКнинг навбатдаги 
сегментини иккинчи праймер (Р2) 
ёрдамида секвенирлаш. 5. 
Узунлиги тахминан 20 
нуклеотиддан иборат секвенирлаб 
бўлинган охирги соҳасига 
комплементар бўлган учинчи 
праймерни танлаб олиш. 6. 
Учинчи праймердан (РЗ) 
клонланган ДНКнинг навбатдаги 
сегментини секвенирлашда 
фойдаланилади. Мазкур жараён 
бутун вставкани секвенирлаб 
бўлингунча давом эттирилади.
 
 
НАЗОРАТ САВОЛЛАРИ 
1.
Айтайлик, сизнинг янги ДНК-синтезаторингиз нуклеотидларни 
98,5% бирлаштиришда ўртача самарадорликка эга. Агар сиз 
узунлиги 50 нуклеотиддан иборат гибридизация зондини 
синтезлаётган бўлсангиз маҳсулотнинг чиқиши қандай бўлади?
2.
Линкер нима? Ундан қаерда фойдаланилади? 
3.
Дидезоксинуклеотидлар нима? Қандай қилиб уларнинг 
ёрдамида ДНКнинг нуклеотид кетма-кетлиги аниқланади? 
4.
Нима учун фақат бир занжирли ДНКнинг нуклеотид кетма-
кетлигини аниқлаш мумкин? 
5.
Қандай қилиб М13 фаги асосидаги вектор тизими ёрдамида 
клонланган ДНК нуклеотид кетма-кетлигини аниқлаш мумкин? 

---

84