Практическое занятие №1

Лабораторная работа.
«Количественное определение белка биуретовым методом»
В основе метода лежит биуретовая реакция. Все белки обладают способностью в щелочной среде давать с раствором сульфата меди фиолетовое окрашивание. Интенсивность развивающейся окраски пропорциональна концентрации белка в растворе.
Ход работы. В четыре сухие пробирки отмеривают из бюреток по 1 мл раствора белка. В первые три пробирки помещают стандартные растворы с содержанием белка 0,5 и 1 и 1,5%. Эти пробы служат для построения калибровочной кривой. В четвертую пробирку наливают раствор с неизвестной концентрацией белка, которую нужно определить.
2. В каждую пробирку наливают по 4 мл биуретового реактива. Содержимое пробирок хорошо перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 20 мин для развития окраски. Окрашенные растворы колориметрируют на ФЭКе в кюветах с толщиной слоя 1 см, пользуясь зеленым светофильтром (длина волны 540 нм). В качестве контрольного раствора при измерении на ФЭКе используют биуретовый реактив.
3. Строят калибровочный график, откладывая на оси абсцисс известные концентрации стандартных растворов белка, а на оси ординат – соответствующие значения оптической плотности.
Зная оптическую плотность раствора белка с неизвестной концентрацией, по калибровочной кривой находят в нем содержание белка.


Практическое занятие № 3.


Тема: Изучение физико-химических свойств белков.


4. Цель: Дать представление студентам о свойствах белков, методах их фракционирования и их клинико-диагностическом значении.


5. Задачи.
После проведения занятия студенты должны:

• 
  Знать свойства белков.
  
• 
  Иметь представление о молекулярной массе белков и форме белковых молекул
  
• 
  Уметь объяснить с чем связана растворимость белков
  
• 
  Уметь дать определение денатурации и ренативации белков, привести примеры
  
• 
  Иметь представление о методе хроматографии и ее видах