Практическое занятие №1

«Реакция на цистеин (реакция Фоля)».
При добавлении к раствору белка раствора гидроксида натрия, ацетата свинца и последующем кипячении раствор начинает темнеть. Реакция обусловлена присутствием в белке цистеиновых и полуцистеиновых остатков, которые при нагревании в присутствии крепкой щелочи разрушаются с образованием сульфида натрия:

СН₂ – SH CH₂OH

│ │
C H – NH₂ + 2NaOH CH – NH₂ + Na₂S + H₂O
│ │
COOH COOH
цистеин серин
Ацетат свинца реагирует со щелочью с образованием плюмбита натрия:
( СН₃СОО)₂Pb + 2NaOH Pb(ONa)₂ + 2CH₃COOH
Сульфид натрия при взаимодействии с плюмбитом дает черный осадок сульфида свинца:
N a₂S + Pb(ONa)₂ + 2H₂O PbS↓ + 4NaOH
Ход работы. В одну приборку наливают 5 капель 1%-ного раствора яичного белка, во вторую – 1%-ного раствора желатина, в третью – раствора миозина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель 30%-ного раствора гидроксида натрия и по 1 капле 5%-ного раствора ацетата свинца. При интенсивном кипячении жидкость в пробирках с яичным белком и миозином темнеет, так как образуется черный осадок сульфида свинца. В пробирке с желатином, который не содержит серосодержащих аминокислот, черного осадка не будет.
Результаты опыта вносят в таблицу.
«Биуретовая реакция на белки».
В щелочной среде раствор белка при добавлении разбавленного раствора сульфата меди окрашивается в синефиолетовый цвет. Окраска обусловлена образованием комплексов ионов меди с пептидными группами белка.
Биуретовую реакцию дает все белки, а также олигопептиды, содержащие не менее двух пептидных связей.
Ход работы. В одну пробирку наливают 5 капель раствора яичного белка, в другую – раствора желатина, в третью – раствора миозина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель 10%-ного раствора NaOH и во всех пробирках наблюдают устойчивое сине-фиолетовое окрашивание.