Практическое занятие №1

Лабораторная работа.
«Качественные реакции на витамины В₁, В₂, РР, В₆».
Качественные реакции на витамин В₁.
Реакция окисления. Принцип метода. В щелочной среде тиамин окисляется в тиохром феррицианидом калия. Тиохром обладает синей флюоресценцией при ультрафиолетовом облучении раствора на флюороскопе.
Ход работы. К 1 капле 5% раствора тиамина прибавляют 5-10 капель 10% раствора едкого натра, 1-2 капли 5% раствора феррицианида калия и взбалтывают. Прогрев флюороскоп в течение 10 мин, наблюдают синюю флюоресценцию при облучении раствора ультрафиолетовыми лучами.
Диазореакция. Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.
Ход работы. К диазореактиву, состоящему из 5 капель 1% раствора сульфаниловой кислоты и 5 капель 5% раствора натрата натрия, добавляют 1-2 капои 5% раствора тиамина и затем по стенке, наклонив пробирку, острожно добавляют 5-7 капель 10% раствора бикарбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжевого цвета.
Качественная реакция на витамина В₂.
Принцип метода. Окисления форма витамина В₂ представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В₂ основана на способности его легко восстанавливаться; при этом роствор витамина В₂, обладающий желтой окраской, приобретает сначала розовый цвет за счет образования промежуточных соединений, а затем обесцвечивается, так как восстановленная форма витамина В₂ бесцветна.
Ход работы. В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В₂, добавляют 5 капель концентрированной хлористоводородной кислоты и опускают зернышко металлического цинка. Начинается выделение пузырьков водорода, жидкость постепенно розовеет, затем обеспечивается. Сравнивают обе формы витамина В₂ по флюоресценции, поместив каждую пробирку у флюороскопа.
Качественная реакция на витамин РР.
Принцип метода. Витамин РР при нагревании с раствором ацетата меди образует синий осадок медной соли никотиновой кислоты, плохо растворимый.
Ход работы. Перед определением 3% раствор витамин РР следует обязательно взболтать. Затем набирают в пробирку 20 капель его и нагревают до кипения; при этом мутный раствор становится прозрачным. Взболтав 5% раствор ацетата меди, приливают 20 капель его к нагретому раствору витамина РР. Затем содержимое пробирки доводят до кипения и сразу охлаждают ее под струей холодной воды; на дне пробирки выпадает синий осадок медной соли никотиновой кислоты.