П. И. Гунькова общая и пищевая микробиология часть I учебное пособие

7.3
. Обнаружение подвижности бактерий 
Многие виды бактерий способны к самостоятельному движе-
нию благодаря наличию у них жгутиков. Расположение жгутиков 
и их количество является одним из диагностических признаков при 
определении вида бактерий.

---

67
Для обнаружения подвижности бактерий готовят препараты 
«висячая капля» или «раздавленная капля», используя молодые (од-
носуточные) бульонные культуры бактерий. При наблюдении под 
микроскопом в поле зрения хорошо видно активное перемещение от-
дельных клеток в разных направлениях и с разной скоростью. 
7.4
. Окрашивание спор бактерий 
Благодаря особенностям своего строения споры бактерий об-
ладают высокой устойчивостью к различным неблагоприятным фак-
торам внешней среды. При обычной обработке препарата метилено-
вым синим споры не окрашиваются и выглядят как бесцветные круг-
лые, овальные или эллипсовидные тельца, хорошо преломляющие 
свет. Это объясняется тем, что оболочка споры обладает большой 
плотностью, характеризуется высоким содержанием липидов и в са-
мой споре отсутствует свободная вода. Методы окрашивания спор 
основаны на применении протравливающих веществ (обычно слабых 
кислот, разрыхляющих оболочку споры) и дальнейшей окраске мазка 
красителем при нагревании. Окрасившийся протопласт споры удер-
живает краситель прочнее, чем цитоплазма клетки, поэтому он, в от-
личие от цитоплазмы, не обесцвечивается при последующей обра-
ботке кислотой. Обесцвеченную цитоплазму дополнительно окраши-
вают контрастным красителем. 
Метод Циля –Нильсена 
1. Готовят обычным способом фиксированный препарат бак-
терий. 
2. На препарат наносят 5 %-й раствор хромовой кислоты и вы-
держивают в течение 5–10 мин. 
3. Кислоту смывают водой, на препарат наносят полоску филь-
тровальной бумаги и обильно смачивают ее карболовым фуксином. 
Подогревают препарат над пламенем спиртовки до появления паров 
(не доводя до кипения), затем отводят его в сторону и добавляют но-
вую порцию красителя. Эту процедуру проводят в течение 5–7 мин. 
Важно, чтобы краситель не испарялся и бумага не подсыхала. 
4. После охлаждения предметного стекла бумагу снимают, 
препарат промывают водой и обрабатывают 1 %-м раствором соляной 
или серной кислоты в течение 15–30 с. При приготовлении препарата 

---

68
спорообразующих палочек 
В. subtilis, B. mycoides
или 
B. mesentericus
цитоплазму клеток рекомендуется обесцвечивать в течение 16–18 с. 
5. Препарат окрашивают метиленовым синим в течение 1–2 мин, 
затем краситель смывают, препарат осушают фильтровальной бумагой 
и рассматривают с иммерсионным объективом. 
При такой обработке препарата споры окрашиваются в крас-
ный цвет, а вегетативные клетки – в синий. 
Метод Пешкова 
1. На приготовленный фиксированный препарат наливают ме-
тиленовый синий Леффлера и, держа стекло над пламенем, кипятят 
в течение 15–20 с, не допуская высыхания краски. 
2. Мазок промывают водой и докрашивают 0,5 %-м раствором 
нейтрального красного в течение 30 с. 
3. Препарат промывают водой, осушают и рассматривают с им-
мерсионным объективом.
При этом методе окраски споры окрашиваются в голубой или 
синий цвет, а цитоплазма клеток – в розовый.
Для идентификации бактерий важно выяснить тип споро-
образования (бациллярный, клостридиальный или плектридиальный), 
расположение эндоспоры в клетке (полярное, центральное, эксцен-
тральное), форму свободных спор (округлые, овальные, цилиндриче-
ские). Для этой цели используют двух- или трехсуточные культуры 
спорообразующих бактерий.