«fizika va kimyo» kafedrasi hayvonlar biokimyosi

 kreatin- fosfatni aniqlash
Kreatin- ko‘ndalang targ‘il muskulning muhim tarkibiy qismi hisoblanadi. 
Skelet muskullarining tarkibida kreatinning miqdori 400- 500 mg%, yurak 
muskulida kreatin 2-3 marta kam bo‘ladi. Miya to‘qimasida taxminan 100 mg % 
miqdorida kreatin bor. 
Muskul to‘qimasida kreatin erkin holatda va fosforli hosilalari(kreatinfosfat, 
fosforkreatin) holatida uchraydi. Kreatin- fosfat makroergik birikma bo‘lib, 
hujayrada energiya manbai hisoblanadi. 
Muskullarni qisqarishi doimo energiya hisobiga sodir bo‘ladi, ya‘ni ATF 
hisobiga- ATF ni regeneratsiyasi kreatinfosfatdagi energiyaga boy guruhni ferment 
kreatinkinaza ishtirokida ko‘chirilishi hisobiga boradi.
Kretinfosfat + ADF γ kreatin+ ATF bo‘ladi.Muskul to‘qimasida erkin 
kreatin va kreatinfosfatning miqdori to‘qimaning fiziologik holatiga bog‘liq. 
Kreatinni aniqlash.
Erkin holatdagi kreatinni oqsilsiz eritmada, diatsetil 
bilan γ - naftol ishtirokida rangli reaksiya natijasida aniqlanadi. 
Kerakli asboblar
:.
Probirkalar bilan shtativ, muz hammomi, tsentrifuga, 
termostat.
 
Reaktivlar: HClO
4
 
-0,5 
M
eritmasi, 
KOH- 2
M
 
eritmasi Diatsetilning 0,05% 
li eritmasi ( bu reaktivni tayyorlash uchun 1,6g dimetilglioksim olib 200 ml sulfat 
kislotaning 5 n. eritmasidan qo‘shib, qumli hammomda qizdiriladi. To‘liq 
erigandan keyin suyuqlik 100 ml li kolbaga solinadi va hajmi distillangan suv bilan 
100 ml ga etkaziladi). 1% li diatsetil eritmasi muzxonada saqlanadi, ishlatishdan 
oldin suv bilan suyultiriladi. 
Oqsilsiz ekstraktni(olish) tayyorlash
.
Fosforli birikmalarni aniqlash 
0-4 ˚C
olib boriladi. 1-2 g muskul to‘qimasidan olib, suyuq azotda muzlatiladi. So‘ngra 
havonchada ezilib, 200- 300 mg kolbaga solinadi. Oldindan sovitilgan 
HClO
4
0,5 
M eritmasi bilan hajmi 10 ml ga etkaziladi, yaxshilab aralashtirilgach, oqsillarni 
cho‘ktirish uchun tsentrofuga qilinadi. 7-8 ml oqsilsiz eritmadan olib, 
2M KOH 
eritmasi bilan neytrallanadi (neytrallash uchun ketgan 
KOH
miqdor hisobga 
olinadi). Keyin eritma sovutilib, cho‘kmaga tushgan 
HClO
4
filtrlab ajratiladi. Bu 
filtratni kreatin va kreatinfosfatni aniqlash uchun ishlatish mumkin.