Biokimyo va molekulyar biologiya

Ishning bajarilishi: 5 ta probirka olib, ularning har biriga sirka kislotadan va natriy atsetat eritmasidan quyidagi jadvalda ko’rsatilgandek qilib solinadi. Shundan so’ng har bir probirkaga 1 ml dan jelatina eritmasidan solinadi va yaxshilab chayqatiladi.

Jadval

Probirka larning №	Bufer eritmaning tarkibi, 0,1 N		eritma pH	0,5% li jelatina	etil spirt, ml	Loyqala nish darajasi
	CH3COOH	CH3COONa
1	1,8	0,2	3,8	1	4	1
2	1,4	0,6	4,4	1	4	3
3	1,0	1,0	4,7	1	4	5
4	0,6	1,4	5,1	1	4	4
5	0,2	0,8	5,7	1	4	3

Oradan 5-10 daqiqa o’tgach hamma probirkalar tekshirib, ularning loyqalanish darajasi ko’riladi. Qaysi probirkadagi loyqalanish eng yuqori bo’lsa, jadvalga qarab shu probirkadagi suyuqlikning pH darajasi topiladi va shunga qarab tekshirilayotgan oqsilning izoelektrik nuqtasi aniqlanadi.
6 – laboratoriya mashg`uloti

Oqsil miqdorini Biuret usuli bo’yicha aniqlash
Uslubning mohiyati: Ishqoriy muhitda mis ionlari oqsil molekulasining peptid bog`lari bilan reaksiyaga kirishib, ko’k – binafsha rang beruvchi kompleks hosil qiladi. Rangning intensivligi oqsil miqdoriga to’g`ri proportsional bo’ladi.

Ishning bajarilishi: Eritma tayyorlash.

1. Oqsil (albumin, pepsin, kazein) ning 1% li NaCl dagi standart eritmasi 10 mg/ml.

2. Biuret eritmasi: 0,15 g CuSO₄ ^.5H₂O va 0,6 g NaKC₄ H₄O₆^.4H₂O (segnet tuzi) 50 ml 1% li NaOH qo’shib distillangan suv bilan 100 mlga keltiriladi. Eritma polietilen idishda saqlanadi.

3. 1% li NaCl.

Kalibirlash egri chizig`ini tuzish. Buning uchun 10 ta probirkaga standart eritmadan 1 mg dan 10 mg gacha miqdorida qilib solinadi. Hamma probirkadagi eritma 1% li NaCl bilan 1 ml gacha keltirilib, unga 8 mldan Biuret eritmasi qo’shiladi. Nazorat sifatida oqsil eritmasi o’rniga 1ml 1% li NaCl olinadi, aralashmalar chayqatib xona haroratida o’lchanadi. Olingan natijalar asosida grafik tuziladi. Bunda ordinata o’qiga 540 nm dagi SF ko’rsatkichi, abtsissa o’qiga esa oqsilning mg/ml miqdori qo’yiladi.