Аминокислот в белках, пептидах и лекарственных препаратах



Download 209,86 Kb.
Pdf ko'rish
bet3/13
Sana23.02.2022
Hajmi209,86 Kb.
#161799
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   13
Bog'liq
2.2.56 Аминокислотный анализ

Гидролизующий раствор. 2,5 М раствор меркаптоэтансульфоновой 
кислоты. 
Парофазный гидролиз. От 1 мкг до 100 мкг испытуемого белка/пептида 
сушат в ампуле для гидролиза. Ампулу помещают в большую ампулу, 
содержащую около 200 мкл гидролизующего раствора. Герметично запаивают 


большую ампулу в вакууме (около 50 мкм ртутного столба, или 6,7 Па). Нагревают 
ампулу для гидролиза до температуры от 170 °С до 185 °С в течение 12,5 мин. 
После гидролиза ампулу с образцом сушат в вакууме в течение 15 мин до 
удаления остатков кислоты. 
МЕТОД 3 
Использование 
тиогликолевой 
кислоты 
(ТГК) 
в 
качестве 
восстанавливающей кислоты предотвращает окисление триптофана при 
гидролизе. 
Гидролизующий раствор. 7 М хлороводородная кислота, содержащая 1 % 
фенола, 10 % трифторуксусной кислоты и 20 % тиогликолевой кислоты. 
Парофазный гидролиз. От 10 мкг до 50 мкг испытуемого белка/пептида 
высушивают в ампуле для гидролиза. Ампулу для гидролиза помещают в 
большую ампулу, содержащую около 200 мкл гидролизующего раствора. Большую 
ампулу герметично запаивают в вакууме (около 50 мкм ртутного столба, или 6,7 
Па). Нагревают ампулу для гидролиза до температуры 166 °С в течение 15—
30 
мин. После гидролиза для удаления остатков кислоты ампулу с образцом 
сушат в вакууме в течение 5 мин. Окрываемость триптофана в этом методе 
зависит от количества испытуемого образца. 
МЕТОД 4 
Перед гидролизом белка проводят окисление цистеина/цистина и 
метионина надмуравьиной кислотой. 
Окисляющий раствор. Смешивают 1 объем 30% раствора водорода 
пероксида и 9 объемов муравьиной кислоты безводной и выдерживают при 
комнатной температуре в течение 1 ч. Полученную надмуравьиную кислоту 
используют свежеприготовленной. 
Методика. Образец белка/пептида растворяют в 20 мкл муравьиной 
кислоты безводной, нагревают при температуре 50 °С в течение 5 мин и 
прибавляют 100 мкл окисляющего раствора. Процесс окисления проводят в 
течение 10—30 мин. В данной реакции цистеин превращается в цистеиновую 
кислоту, а метионин — в метионинсульфон. Избыток реактива удаляют из образца 
при помощи вакуумного центрифугирования. Окисленный белок может быть затем 
гидролизован по методу 1 или методу 2. При наличии галогенидов эта методика 
может приводить к модификации остатков тирозина. 
МЕТОД 5 
Окисление цистеина/цистина происходит во время жидкофазного гидролиза 
с натрия азидом. 

Download 209,86 Kb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   13




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish