Amaliy enzimologiya

1.
 
Aktivatorlar va inhibitorlarning ferment faolligiga ta'siri 
Harorat va pH o'ziga xos bo'lmagan omillardir, chunki ular barcha fermentlarning 
faolligiga u yoki bu darajada ta'sir qiladi. Bundan tashqari, juda past 
konsentratsiyalarda fermentlar (aktivatorlar) faolligini oshiradigan yoki aksincha, 
uni kamaytiradigan (inhibitorlar) moddalar mavjud. Aktivatorlar va inhibitorlar 
faol markazda yoki undan uzoqroqda, ferment molekulasining allosterik markazida 
harakat qilishlari mumkin. 
Fermentlarning faolligini oshiradigan moddalarga metall kationlari yoki anionlar 
va boshqa ba'zi moddalar kiradi. Ko'pincha ferment faollashtiruvchilari Ca2 +, 
Mg2 +, K + va Na + kationlari, va anionlardan - Sl-. Aktivatorlar ferment-substrat 
kompleksining shakllanishini osonlashtirishi yoki barqarorlashtirishi mumkin. 
Tiol ferment faollashtiruvchisi glutation (b-glutamilsisteylglisin tripeptid) 
fermentning faol markazini oksidlovchilar ta'siridan himoya qiladi va shu bilan 
uning katalitik faolligini oshiradi. Koenzimlar va kofaktorlardan farqli o'laroq, 

---

aktivatorlar katalitik ta'sirni kuchaytiradi, ammo ularning yo'qligi fermentativ 
reaktsiyaning davom etishiga to'sqinlik qilmaydi. Fermentatik reaktsiyani 
sekinlashtiradigan inhibitorlar nonspesifik (barcha fermentlarni va umuman barcha 
oqsillarni inaktiv qiluvchi denatura qiluvchi reagentlar) va o'ziga xoslarga 
bo'linadi.
Ikkinchisi faqat ma'lum fermentlarga ta'sir qiladi va qaytarilmas va 
qaytariladigan bo'linadi. Qaytarib bo'lmaydigan faol markazni yoki butun ferment 
molekulasini kovalent ravishda o'zgartiradi va ular chiqarilgandan keyin faollik 
tiklanmaydi. Qayta tiklanadigan moddalar ferment ishini vaqtincha inhibe qiladi, 
shuning uchun ularni olib tashlash fermentlar faolligini tiklashga olib keladi. Qayta 
tiklanadigan ingibitorlar raqobatbardosh, raqobatsiz va aralash deb tasniflanadi: 
 
Raqobat inhibitörleri tuzilishi jihatidan substratga o'xshaydi; ular fermentning 
faol markaziga qo'shiladi, ammo fermentativ konversiyalashdan o'tmaydi va uning 
ishini bloklaydi. Ushbu vaziyatning klassik namunasi - suktsinatga o'xshash 
suktsinat dehidrogenazani malonat tomonidan inhibe qilish: 
Raqobat inhibitörleri kofermentga o'xshash bo'lishi mumkin, ular faol markazga 
birlashadi, ammo koferment funktsiyalarini bajara olmaydi (izoniazid va 
piridoksamin kabi). Qanday bo'lmasin, bu inhibisyon substrat kontsentratsiyasini 
oshirish orqali bartaraf etiladi, chunki Shu bilan birga, u faol markazdan siljiydi va 

---

maksimal reaksiya tezligi o'zgarishsiz qoladi, ammo fermentning substratga 
yaqinligini bilvosita tavsiflovchi Mayklis doimiysi ortadi (va shunga qarab afinitin 
kamayadi inhibitorning mavjudligi): 
Anjir. 9a. Raqobatbardosh inhibisyon. Teskari koordinatalarda grafik quyidagicha 
ko'rinadi: 
Anjir. 9b. Teskari koordinatalarda raqobatbardosh inhibisyon. 
Raqobat tormozlanishini quyidagi kinetik sxema bilan tavsiflash mumkin: 
Keling, ferment uchun moddiy muvozanat tenglamasini yozamiz, unda bu holda 
uchta atama bo'ladi: 

---

Keling, [E] ni shu erda ifodalaymiz va ifoda Mayklis doimiyligini almashtiramiz:
Endi [ES] ni shu yerdan ifodalaymiz va ifodani Mayklis-Menten tenglamasiga 
o'xshash shaklga o'tkazamiz: 

---

Demak, Vmax raqobatbardosh inhibisyon paytida o'zgarmaydi, Km qiymati esa 
ortadi. Uni o'zgartirib, siz KI ni hisoblashingiz mumkin.