Amaliy enzimologiya

5-MAVZU: FERMENTLARNI IMMOBILIZATSIYA QILISH 
1. Fermentlarni immobilizatsiya qilish usullari 
2. Fermentlarni jismoniy usullar bilan immobilizatsiya qilish, 
3. Kimyoviy immobilizatsiya usullari, jelni kiritish orqali immobilizatsiya qilish, 
yarim o'tkazgichli membranalar bilan immobilizatsiya 
Kalit 
so'zlar
: 
enzimatik 
jarayon, 
fermentning 
modifikatsiyasi, 
immobilizatsiyalangan fermentlarning katalitik faolligi, immobilizatsiyalangan 
fermentlar uchun tashuvchilar, dekstran, sefadeks, erimaydigan ommaviy axborot 
vositalarida adsorbsiya, jelning ko'zgusiga kiritilishi, fermentning yarim 
o'tkazuvchan septum (membranalar) yordamida reaksiya tizimining qolgan 
qismidan bo'shliqqa bo'linishi, ikki fazali muhitga qo'shilishi. 
Quritish paytida ular osongina siqiladi, suvli eritmada kuchli shishadi. Ushbu 
ommaviy axborot vositalarida jeldagi teshik hajmi o'zaro bog'liqlik darajasi bilan 
tartibga solinadi. Dekstranlar guruhiga kraxmal kiradi. Kimyoviy o'zgartirilgan 
kraxmal formaldegid kabi moddalar bilan tikiladi. Shunday qilib, fermentlarga, 
gidrolizga nisbatan yuqori qarshilikka ega bo'lgan shimgichni kraxmal ishlab 
chiqarildi. Dekstranga asoslangan suvda eruvchan preparatlar ko'pincha tibbiyotda 
dori vositasi sifatida ishlatiladi. Agar yaxshi tashuvchi hisoblanadi. Uning 
xususiyatlari kimyoviy tikuvdan keyin, masalan, diepoksi birikmalar bilan 
yaxshilanadi. Bunday agar issiqlikka chidamli bo'ladi, u bardoshli, osonlik bilan 
o'zgartiriladi. Media sifatida oqsillar bir qator afzalliklarga ega: keng, 
biodegradatsiyaga qodir, nozik (qalinligi 80 mm) membrana sifatida ishlatilishi 
mumkin. Proteinli tashuvchilarda fermentlarni immobilizatsiya qilish ham 
yo'qligida, ham tikuv agentlari ishtirokida amalga oshirilishi mumkin. Proteinlar 
asosiy biologik tadqiqotlar va tibbiyotda qo'llaniladi. Protein etishmovchiligi 
ularning yuqori immunogenikligini (kollagen va fibrin bundan mustasno) 
tashuvchilar sifatida o'z ichiga oladi. Eng tez-tez immobilizatsiya uchun 
strukturaviy (keratin, fibrin, kollagen), kontraktil (miyosin) va transport (albumin) 
oqsillari ishlatiladi. Sintetik polimer tashuvchilari fermentlarning kovalent va 
sorbsion immobilizatsiyasi, jel, mikrokapsullar ishlab chiqarish uchun ishlatiladi. 
Stirolga asoslangan polimerlar sorbsion immobilizatsiyadan foydalanadi. Ular 
makroporik, izoporistik tuzilishga, shuningdek, heteroporik tuzilishga ega bo'lishi 
mumkin. Polimer hidrofilik vositalarni ishlab chiqarish uchun akrilamid - akril 
kislota lotin keng qo'llaniladi. Fermentlarni va hujayralarni qattiq mekansal 
mekansal tuzilishga ega bo'lgan poliakrilamid jelga kiritish usuli keng tarqalgan. 
Poliakrilamid jeli kimyoviy ta'sirlarga chidamli. Poliamid tashuvchilar juda 
qiziqarli guruhdir. Ular takroriy amid guruhi-C(o)NH-bilan turli xil heterosepik 
polimerlarning guruhlari. Misol uchun, N-vinil pirolidonga asoslangan polimerlar 
organizmda asta-sekin parchalanib ketishi mumkin bo'lgan immobilizatsiyalangan 
fermentlarni ishlab chiqarish uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, ular biologik 
inertdir, bu tibbiy maqsadlarda foydalanilganda ayniqsa muhimdir. Ko'pgina 
polimer tashuvchilarning muhim kamchiliklari ularning tanada to'planishi 

---

qobiliyatidir. Shu nuqtai nazardan, fermentlar tomonidan gidrolizlangan tabiiy 
polimerlarga afzallik beriladi. Shuning uchun, dori tarkibi tez - tez dekstran va 
sintetik tashuvchilar o'z ichiga oladi-n-vinylpirrolidon asoslangan polimerlar. 
Hozirgi vaqtda toksik bo'lmagan metabolik mahsulotlarni hosil qilish uchun 
bo'linadigan sintetik polimerlarni yaratish bo'yicha tajribalar olib borilmoqda. 
Fermentlarni immobilizatsiya qilish usullari fermentlarni immobilizatsiya 
qilishning ikkita asosiy usuli mavjud: jismoniy va kimyoviy. Fermentlarning 
jismoniy immobilizatsiyasi fermentning umumiy hajmning faqat cheklangan qismi 
mavjud bo'lgan muhitda kiritilishi hisoblanadi. Jismoniy immobilizatsiya bilan 
ferment kovalent bog'lanishlar tashuvchisi bilan bog'liq emas. Fermentlarni 
ulashning to'rt turi mavjud: - erimaydigan tashuvchilarda adsorbsiya; - jelning 
gözeneklerine kiritish; - yarim o'tkazuvchan septum (membrana) yordamida 
reaksiya tizimining qolgan qismidan fermentni bo'shliqqa ajratish; - eruvchan 
holatdagi ferment faqat bosqichlardan birida bo'lishi mumkin bo'lgan ikki fazali 
muhitga qo'shilishi.