1 O‘zbekiston respublikasi oliy va o‘rta ta’lim vazirligi

 
 
83 
Ikkala holatda ham probirkadan olinadigan fraksiyalar spektrofotometr 
kyuvetasidan o‘tib UB -nurni yutishi o‘lchab boriladi. 
260 nm da hosil bo‘lgan zonadagi virus fraksiyasi ajratib olinadi va toza 
preparatni saxarozadan ajratib olingandan so‘ng toza preparatlarga bo‘lgan 
mezonlar bo‘yicha tahlil qilinadi. 
TMV ni biospetsifik xromotografiya usulida tozalash. 
Poliamid 
granulalaridan biospetsifik sorbent tayyorlash uchun P-6 markali poliamid 
kukuni (2x2 mm) olinadi.
 
Poliamid kukuni to‘qimachilik kombinatidagi chiqindi kapronlardan 
tayyorlanadi, ularni konsentrlangan xlorid kislotada (d=l,17) eritib (1 kg kapron 
matosiga 2,5 l xlorid kislota hisobida), unga 0-50 hajmda atsetonning suvli 
eritmasi 1 l/g tezlikda aralashtirilgan holda quyiladi. Poliamid cho‘kmasi 
dekantatsiya yo‘li bilan ajratib olinadi, so‘ngra Byuxner voronkasida filtrlanib, 
havoda quritiladi va elanadi (0,14, 0,25, 0,5, 1 mm teshikli elaklar ishlatiladi. 
Poliamid granulalarini faollashtirish uchun ularni 3,0 n xlorid kislotada 45°S 
da 2 soat davomida inkubatsiya qilinadi (1:2 nisbatda). So‘ngra poliamid 
granulalari avval suv bilan, so‘ngra 0,1 M borat bufer (pH 8,5) bilan yuviladi. 
Bu granulalar ligand reaksiyaga qobiliyatli aminoguruhlarga ega. 
Biosietsifik sorbentni sintezlashda xuddi shu guruhlarni ligand bilan biriktiriladi. 
Biriktirish bifunksional birikmalar (glutar aldegid) orqali amalga oshiriladi. 
Bu birikmaning poliamidga birikishi xona haroratida olib boriladi. SHiff 
reaksiyasi asoslarini hosil qilish prinsipida ishqoriy muhitda (pH 8,0 - 9,5) olib 
boriladi. Reaksiya modifiktator ishtirokida boradi. Modifikatsiya qilish quyidagi 
tartibda olib boriladi: faollashtirilgan poliamid granulalariga 0,1 M borat buferi 
(pH 9,0) solinadi, so‘ngra 6 marta ko‘p hajmda glutaraldegid (1 g sorbentga 2,5% 
li glutar aldegiddan 3.14 ml) solinadi. So‘ngra kechasiga muttasil aralashtirilgan 
holda qoldiriladi. Reaksiyaga kirmagan glutar aldegidni 4 marta suyultirilgan 
bufer bilan yuvib tashlanadi. 
Poliamid 
granulalarini 
glutardialdegidi 
bilan 
modifikatsiya 
qilish 
quyidagicha boradi. 
So‘ngra bu modifikatsiyalangan poliamidga ligand (AT) ulanadi, yangi 
tozalangan antitelodan 10 mg solib 2 sutka sovutgichda muttasil aralashtirgan 
holda qoldiriladi. Endi modifikatsiyalangan kapronga TMV antitelasi birikadi 
(SHiffa reaksiyasi asosida) lizin amina guruhi orqali, birikmagan ortiqcha 
antitelolar so‘rib tashlanadi, poliamid esa 30 marta oshiq hajmdagi 0,1 M borat 
buferi (rN 9,0) bilan, so‘ngra 20 marta ortiq hajmdagi shu bufer bilan yuviladi. 
Ochiq qolgan erkip aldegid guruhlarini bloklab qo‘yiladi. Buning uchun 
biospetsifik sorbentga monoetanolamin (MEA) solinadi (1g poliamidga 0,36 ml 

---