Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Работа 27. Качественная проба на молочную кислоту 
Анаэробный гликолиз в тканях животных завершается образованием мо-
лочной кислоты­, которую можно обнаружить с помощью реактива Уффельма-на: 
комплексный фенолят железа фиолетового цвета в присутствии молочной 
кислоты превращается в молочнокислое железо желтовато-зеленого цвета. 
3С
6
Н
5
ОН + FeCl
3
→ (C
6
H
5
O)
3
Fe + 3HCl 
Реактивы и оборудование: 
Фенол 
(1 %),
хлорид железа 
(III) (1 %),
молочная кислота 
(0,5
–1 %),
мыш
-
цы 
лягушки 
(
свежие
),
лед
.
Термостат
,
воронки
,
фильтры 
(
марля
,
бумаж
-
ные
),
 
ступки с пестиком
,
стеклянные лопаточки
,
кварцевый песок
,
штативы с 
сухими
­
 пробирками
. 
Ход работы: 
Мышечную ткань
 
(свежую)
 
измельчают при охлаждении,
 
за­
 
тем 2–3 г ее растирают с кварцевым песком, добавив 5–7 мл воды, в фарфоро-
вой ступке. Полученную мышечную кашицу фильтруют через двойной слой 
марли. Фильтрат кипятят 1 минуту, охлаждают, затем фильтруют через влаж-
ный бумажный­ складчатый фильтр. 
В три пробирки наливают по 5 мл 1 % раствора фенола и по каплям 
прибавляют 1 % раствор хлорида железа (III) до появления интенсивного 
фиолетового окрашивания (реактив Уффельмана). 
Затем в одну пробирку приливают 1 мл 0,5 % раствора молочной кислоты, 
во вторую — вытяжку из мышечной ткани, а в третью — 1 мл дистиллиро-
ванной воды­ (контроль). Содержимое пробирок перемешивают. Наблюдают 
переход фиолетового окрашивания в первой и второй пробирках в 
зеленовато-желтый, в третьей — цвет раствора не меняется. 
129 

---