Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Ход работы: 
Осаждают белок из анализируемой биологической жидкости
 
(кровь, сыворотка крови, гемолимфа). С этой целью в центрифужной про-бирке 
смешивают 0,4 мл 5 % раствора сульфата цинка, 0,4 мл 0,3 н. раствора гидроксида 
натрия и 1,1 мл 0,9 % раствора хлорида натрия, затем добавляют 0,1 мл 
исследуемой­ биологической жидкости. Содержимое пробирки тщатель-но 
перемешивают­ и центрифугируют при 5 000 об. / мин. в течение 10–15 минут. 
Из центрифужной пробирки переносят в химическую­ пробирку 1 мл на-
досадочной жидкости и приливают 3 мл рабочего реактива для определения 
глюкозы. Одновременно в три пробирки приливают по 1 мл стандартного 
раствора глюкозы­ соответственно 50, 100, 200 мкг / мл и в две пробирки (кон­ 
трольные) — по 1 мл воды. Затем во все пробирки с интервалом в 2 минуты 
приливают­ по 3 мл рабочего реактива. Эту последовательность следует соблю-
дать (интервал 2 минуты) и при измерении оптической плотности растворов. 
Через 10 минут после добавления рабочего реактива измеряют оптическую 
плотность исследуемого и стандартных растворов против контроля на фото­ 
электроколориметре при красном светофильтре (620 нм). 
На основании полученных величин оптической плотности для всех стан­ 
дартных растворов глюкозы строят стандартную кривую, по которой 
рассчитывают количество глюкозы в исследуемой биологической жидкости. 
Вопросы и задания для самопроверки 
1.
На чем основана классификация углеводов? 
2.
Докажите некорректность термина «углеводы», приведите примеры. 
3.
Напишите в ациклической и циклической форме моносахариды: D-рибозу, 
D-глюкозу, D-маннозу, D-галактозу, D-фруктозу. 
4.
Напишите проекционные формы по Хеуорсу для α- и β-аномерных форм 
глюкозы, фруктозы, галактозы. В чем состоит основное различие между 
этими формами? 
5.
С помощью каких реакций можно доказать наличие в молекуле глюкозы 
альдегидной группы и пяти гидроксильных групп? 
6.
С помощью каких реакций можно осуществить следующие 
превращения: а) сахароза → глюкоза → глюконовая кислота; 
б) СО
2
→ С
6
Н
12
O
6
→ (С
6
Н
11
О
5
)
n
→ С
6
Н
12
О
6
→ С
2
Н
5
ОН. 
7.
На чем основаны качественные реакции на углеводы? Каково их практиче­ 
ское значение? 
8.
На чем основаны методы количественного определения углеводов? Какие 
методы количественного определения углеводов наиболее достоверны? 
127 

---

9.
Напишите уравнения реакций
,
с помощью которых можно различить 
глюко
­
зу и фруктозу
. 
10.
Какие моносахариды можно открыть реакцией Селиванова
?
Напишите 
уравнения реакций
. 
11.
Какое явление называют реакцией серебряного зеркала
?
Напишите уравне 
ние реакции
. 
12.
Напишите уравнения реакций дегидратации рибозы и фруктозы в 
присутст вии концентрированной соляной кислоты
. 
13.
В каких условиях протекает гидролиз ди
-
и полисахаридов
?
Напишите 
уравнения
­
реакций гидролиза мальтозы и целлюлозы
. 
14.
Почему дисахарид сахароза не может существовать в двух аномер
-
ных 
формах
­,
тогда как дисахарид мальтоза может существовать в двух 
α
-
и 
β
-
аномерных формах
.
Изобразите проекционные формы Хеуорса для 
аномерных форм лактозы и сахарозы
. 
15.
Какими особенностями строения обусловлены различия в свойствах глико 
гена и целлюлозы
?
Изобразите схемы строения молекул гликогена и 
целлюлозы
.
Каковы биологические функции гликогена и целлюлозы
?