|
Работа 17. Определение витамина С в растительном материале
Метод основан на способности витамина С восстанавливать
2,6‑
дихлор
-
фенолиндофенол
,
который в кислой среде имеет красную окраску
,
а при вос
становлении обесцвечивается
,
в щелочной среде окраска синяя
.
Для предохра
нения витамина С от разрушения исследуемый раствор титруют в кислой
среде щелочным раствором
2,6‑
дихлорфенолиндофенолом до появления
розового окрашивания
.
Для расчета содержания аскорбиновой кислоты в миллиграммах на
100
г
растительного
продукта используют формулу
: X = 0,088•
А
•
Г
•100 /
Б
•
В
,
где
X
—
содержание
витамина С в миллиграммах на
100
г продукта
, 0,088
—
содержа
-
ние аскорбиновой кислоты
(
мг
),
А
—
результат титрования
0,001
н
.
раствором
натриевой
соли
2,6‑
дихлорфенолиндофенолом
(
мл
),
Б
—
объем экстракта
,
взя
-
тый для титрования
(
мл
),
В
—
количество продукта
,
взятого для анализа
(
г
),
Г
—
общее количество экстракта
(
мл
), 100
—
пересчет на
100
г продукта
.
Реактивы и оборудование:
Растительный материал
(
ягоды шиповника
,
хвоя
,
капуста
,
морковь
,
кар
тофель
),
соляная кислота
(10 %), 0,001
н
.
раствор натриевой соли
2,6‑
дихлор
-
фенолиндофенола
.
Весы разновесы
,
фарфоровые ступки с пестиками
,
мерные
цилиндры на
25
мл
,
мерные колбы на
25
мл
,
конические колбы
,
воронки
стеклянные
,
пипетки на
1, 2, 5
мл
,
микробюретки на
4, 5
мл
,
кварцевый песок
,
бумажные фильтры
.
Ход работы:
1.
Приготовление растительного материала
.
Взвешивают ис
следуемый растительный материал
: 1
г ягод шиповника
,
или
1
г сосновой хвои
,
или
1
г капусты
,
или
5
г картофеля
,
или
5
г капусты
.
Мелко измельчают
,
поме
щают в ступку и растирают с небольшим количеством кварцевого песка
, 2
мл
89
10 %
соляной кислоты
, 8
мл дистиллированной воды
.
Затем без потерь содер
жимое ступки переносят в мерную колбу на
25
мл и доводят водой до метки
.
Полученную смесь оставляют на
5
–
10
минут
,
постоянно перемешивая
.
Затем
содержимое колбы фильтруют через бумажный складчатый фильтр
.
Экстракт
,
полученный из картофеля
,
не фильтруют
.
2.
Титрование
.
Для титрования отмеряют
2
мл фильтрата
,
добавляют
10
ка
-
пель
10 %
раствора соляной кислоты и титруют
0,001
н
.
раствором
натриевой
соли
2,6‑
дихлорфенолиндофенола
до
розовой
окраски
,
сохраняющейся в течение полминуты
.
3.
Расчет
.
Вычисляют содержимое аскорбиновой кислоты в
100
г
исследуемого растительного материала по формуле
,
приведенной выше
.
Работа 18. Определение содержания витамина С в моче
Определение содержания витамина С в моче дает представление о запасах
этого витамина в организме
,
так как наблюдается соответствие между концен
трацией витамина С в крови и количеством этого витамина
,
выделяемого с мо
чой
.
Однако при гиповитаминозе С содержание аскорбиновой кислоты в моче не
всегда понижено
.
Часто оно бывает нормальным
,
несмотря на большой не
достаток этого витамина в тканях и органах
.
У
здоровых людей введение
p
er os 100
мг витамина С быстро приводит
к
повышению его концентрации в крови и моче
.
При гиповитаминозе С тка
-
ни
,
испытывающие недостаток в витамине
,
задерживают принятый витамин
С
,
и его концентрация в моче не повышается
.
Моча здорового человека
содержит
20
–30
мг витамина С или
113,55
–170,33
мкмоль
/
сут
.
У детей
уровень этого витамина понижается при цинге
,
а также острых и хронических
инфекционных заболеваниях
.
Реактивы и оборудование:
Моча
,
соляная кислота
(10 %),
натриевая соль
2,6‑
дихлорфенолиндофе
-
нола
(0,001
н
.).
Конические колбы на
50
–100
мл
,
мерные цилиндры на
10
мл или
пипетки на
10
мл
,
микробюретки
,
капельные пипетки
.
Ход работы:
В стаканчик или колбочку отмеривают
10
мл мочи и
10
мл
дистиллированной
воды
,
перемешивают
,
подкисляют
20
каплями
10
%
раство
-
ра
соляной кислоты и титруют
0,001
н
.
раствором
2,6‑
дихлорфенолиндофенола до
розовой окраски
.
Расчет содержания аскорбиновой кислоты в моче проводят по
формуле
:
X = 0,088 •
А
•
В
/
Б
,
где
X
—
содержание аскорбиновой кислоты
(
мг
/
сут
);
А
—
результат титрования
0,001
н
.
раствором
2,6‑
дихлорфенолиндо
-
фенола
(
мл
);
Б
—
объем мочи
,
взятый на титрование
(
мл
);
В
—
среднее суточ
-
ное количество мочи
(
для мужчин
—
1 500
мл
,
для женщин
—
1 200
мл
).
90
Работа 19. Определение витамина Р в чае — черном и зеленом
Рутин способен окисляться перманганатом калия, в качестве индикатора
применяется индигокармин, который вступает в реакцию с перманганатом
калия, после того как окислится весь рутин. Экспериментально установлено,
что 1 мл 0,1 н. раствора перманганата калия окисляет 6,4 мкг рутина.
Реактивы и оборудование:
Чай: черный и зеленый, индигокармин, 0,05
н. раствор перманганата
калия. Весы разновесы, конические колбы, микробюретки, мерные цилиндры
на 50 мл, пипетки на 10 мл, капельные пипетки.
Ход работы:
К
100 мг чая черного и отдельно зеленого приливают
50 мл
горячей дистиллированной воды и проводят экстракцию в течение 5 минут. 10 мл
экстракта черного и зеленого чая помещают в конические колбы, добавляют по
10 мл дистиллированной воды и 5 капель индигокармина, содержимое колб
окрашивается в синий цвет. Титруют из микробюретки 0,05 н. раствором
перманганата калия до появления устойчивой желтой окраски.
Определяют процентное содержание витамина Р в чае по формуле:
X = 3,2 • A • V
1
• 100 / V
2
• P • 1 000
, где X — содержание витамина Р в чае (%),
3,2 — стандартный пересчетный коэффициент; А — результат титрования
0,05 н. раствором перманганата калия (мл); V
1
— объем, в котором растворена
взятая для анализа навеска (мл); 100 — общее количество вещества для расче-
та процентного содержания (г); V
2
— объем раствора, взятый для титрования
(мл); Р — навеска (мг); 1 000 — перевод микрограммов в миллиграммы. Срав-
нивают содержание витамина Р в черном и зеленом чае.
Работа 20. Количественное определение тиамина (В
1
) в моче
Определение основано на окислении тиамина в тиохром, экстракции тиох-
рома органическим растворителем и изменении интенсивности голубой флюо
ресценции. Для количественного определения тиамина сравнивают флюорес
ценцию окисленных стандартных и испытуемых растворов тиаминхлорида на
флюорометре.
Do'stlaringiz bilan baham: |
