Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

 
1 мл
 
5 %
 
раствора мочевины и пo 5
 
капель
 
1 % спиртового раствора фенолфталеина. В одну из пробирок добавляют 5 мл 
препарата уреазы, в другую дистиллированную воду и перемешивают. Через 
некоторое время наблюдают в одной из пробирок (с уреазой) окрашивание в 
розовый­ цвет. 
Действие каталазы (КФ 1.11.1.6) 
Каталаза (класс оксидоредуктаза, подкласс пероксидаза) ускоряет 
реакцию расщепления пероксида водорода: 
2Н
2
О
2
→ 2Н
2
О + О
2 
В этой реакции одна молекула пероксида водорода окисляется и слу-жит 
донором­ электронов, а другая восстанавливается и является акцептором 
электронов­. Процесс передачи электронов при окислении и восстановлении 
пероксида водорода осуществляется железом, входящим в геминовую группи-
ровку каталазы. Каталаза — фермент двухкомпонентный, содержащий четыре 
гемовых группы, близких к гему гемоглобина. Биологическая роль каталазы 
заключается в предохранении организма от токсического действия пероксида 
водорода, образующегося вследствие процессов окисления. Каталаза широко 
распространена в растительном и животном мире. Особенно много ее содер-
жится в эритроцитах крови и в тканях печени. 
Реактивы и оборудование: 
Кровь, 3 % свежеприготовленный раствор пероксида водорода, дистилли-
рованная вода. Пробирки, секундомер. 
61 

---

Ход работы: 
В две пробирки наливают по
 
5 мл
 
3 %
 
свежеприготовленного
 
раствора пероксида водорода. В одну из пробирок добавляют 0,5 мл свежей 
крови и перемешивают, в другую — 0,5 мл Н
2
О (дистиллированной). В 
пробирке с кровью появляются пузырьки. В пробирке без каталазы пузырьки 
газа не образуются. По секундомеру отмечают время протекания реакции (по 
вы-делению пузырьков кислорода). 
Действие липазы (КФ 3.1.1.3) 
Триацилглицеринлипаза (класс гидролаза, подкласс эстераза) ускоряет 
гидролиз триглицеридов (жиров) ступенчато, вначале быстро гидроли-зуются 
внешние сложноэфирные связи, а затем медленно идет гидролиз 2-
моноглицерида. 
Липазы широко распространены в растениях (семена, вегетативные орга-
ны), микроорганизмах, животных. 
В активном центре панкреатической липазы находятся аминокислотные 
остатки: 
гис,
сер,
иле,
асп,
глу
. Как и в случае других гидролаз 
гис
служит для 
переноса­ протонов, а 
сер
для ацептирования ацильной группы, 
иле
взаимо­ 
действует с углеводородным радикалом остатка высшей жирной кислоты и 
способствует­ закреплению молекулы триглицерида в активном центре фер-
мента. Активность­ липаз регулируется путем их фосфорилирования — 
дефос-форилирования.