Tahlilni xromatografik usullari, tasnifi va sifat tahlilda qo`llanishi

xulosalar
1. Ko'p komponentli aralashmada HPLC usuli yordamida süksin kislotasini miqdoriy tahlil qilish uchun optimal shartlar aniqlandi.
2. “Adanol” preparatining tarkibiy qismlarini, shu jumladan aralashmalarni, 3% dan ko'p bo'lmagan aniqlashning nisbiy xatosi bilan sifat va miqdoriy tahlil qilish texnikasi ishlab chiqilgan.
Foydalanilgan adabiyotlar ro'yxati
1. M.A. Kazmin, A.V. Mixalev, A.P. Arzamastsev "HPLC tomonidan "BICILLIN-3" preparatining tarkibiy qismlarini aniqlash" // Dorixona - 5-son - 2002 yil - 5-6-bet.
2. T.X. Vergeichik, N.S. Onegov "HPLC propifenazonni o'z ichiga olgan preparatlarni tahlil qilishda" // Dorixona - 6-son - 2002 - p.13-16.
3. A.Yu. Petrov, S.A. Dmitrichenko, A.L. Kovalenko, L.E. Alekseeva "Adanol" preparatini standartlashtirish // Dorixona - № 5 - 2002 - p.11-13.
Qo'shimcha
1. Baram G.I., Fedorova G.A. // Xromatografiyani oziq-ovqat, mikrobiologiya va tibbiyot sanoatida qo'llash: Mat. Vses. Konf. - Gelendjik, 1990 - S.43-44.
2. Krichkovskaya L.V., Chernenkaya L.A. // Xromatografiyani oziq-ovqat, mikrobiologiya va tibbiyot sanoatida qo'llash: Mat. Vses. Konf. - Gelendjik, 1990 yil 8-12 oktyabr, M., 1990. - P.49.
3. Xromatografiya: Usulning amaliy qo'llanilishi: 2 qismdan iborat. 2-qism - M.: Mir, 1986. - 422 b.
Suyuqlik xromatografiyasi Bu suyuqlik harakatlanuvchi faza bo'lgan moddalarning murakkab aralashmalarini ajratish va tahlil qilish usuli. Bu gaz xromatografiyasi usulidan ko'ra kengroq miqdordagi moddalarni ajratish uchun qo'llaniladi. Buning sababi shundaki, ko'pchilik moddalar uchuvchan emas, ularning ko'pchiligi yuqori haroratda beqaror (ayniqsa, yuqori molekulyar birikmalar) va gaz holatiga o'tganda parchalanadi. Suyuq xromatografiya yordamida moddalarni ajratish ko'pincha xona haroratida amalga oshiriladi.
Suyuqlik xromatografiyasining barcha turlarining xususiyatlari undagi harakatchan fazaning suyuqlik bo'lishi va gaz va suyuq elimentdan komponentlarning sorbsiyasi turlicha borishi bilan bog'liq. Agar gaz xromatografiyasida tashuvchi gaz faqat transport vazifasini bajarsa va statsionar fazada sorblanmagan bo'lsa, suyuq xromatografiyada suyuq harakatlanuvchi faza faol elyuent bo'lib, uning molekulalari statsionar faza tomonidan sorbsiyalanishi mumkin. Kolonnadan o'tayotganda, tahlil qilinadigan aralashmaning elimentdagi tarkibiy qismlarining molekulalari sorbentning sirt qatlamidan eluent molekulalarini siqib chiqarishi kerak, bu esa molekulalar orasidagi o'zaro ta'sir energiyasini pasayishiga olib keladi. tahlil qilingan modda va sorbent yuzasi. Shuning uchun, saqlangan hajmlarning qiymatlari V R, sistemaning erkin energiyasining oʻzgarishiga proporsional boʻlib, suyuqlik xromatografiyasida gaz xromatografiyasiga qaraganda kichikroq, suyuq xromatografiyada sorbsiya izotermasi chiziqlilik diapazoni kengroqdir.
Turli xil elyuentlardan foydalangan holda, xromatografik tizimning ushlab turish parametrlari va selektivligini o'zgartirish mumkin. Suyuqlik xromatografiyasida selektivlik gaz xromatografiyasidan farqli ravishda bir emas, balki ikki omil - harakatlanuvchi (eluent) va statsionar fazalarning tabiati bilan belgilanadi.
Suyuq harakatlanuvchi faza gazsimon fazaga qaraganda yuqori zichlik va yopishqoqlikka ega, diffuziya koeffitsientlari D yaxshi Gazga qaraganda 3-4 daraja pastroq. Bu suyuqlik xromatografiyasida gaz xromatografiyasiga nisbatan massa almashinuvining sekinlashishiga olib keladi. Termin tufayli Van Deemter tenglamasi IN suyuqlik xromatografiyasida rol o'ynamaydi ( D yaxshi  D G), samaradorlikning grafik bog'liqligi ham o'zgaradi H harakatlanuvchi faza oqimining chiziqli tezligi bo'yicha shaklda ko'rsatilgan shaklga ega. 1.9.

Ustunli suyuqlik xromatografiyasining klassik variantida zarracha hajmi 100 mkm bo‘lgan sorbent va eluent bilan to‘ldirilgan 1–2 m balandlikdagi shisha kolonkaga tahlil qilinayotgan namunani eluentda erigan holda AOK qilinadi va elyuent undan o‘tkaziladi. , ustunning chiqishida eluat qismlarini olish. Suyuq xromatografiyaning ushbu versiyasi hali ham laboratoriya amaliyotida qo'llaniladi, ammo tortishish ta'sirida eluent oqimining tezligi past bo'lgani uchun tahlil uzoq davom etadi.

Suyuq xromatografiyaning zamonaviy versiyasi, ya'ni yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi HPLC, zarrachalar hajmi 5-10 mkm bo'lgan hajmli va sirt g'ovakli sorbentlardan, tizimda 400 atmgacha bosimni ta'minlaydigan bosimli nasoslardan va yuqori darajadagi suyuqlikdan foydalanadi. sezgir detektorlar. Tez massa almashinuvi va yuqori ajratish samaradorligi HPLC dan molekulalarni ajratish uchun (suyuqlik-adsorbsion va suyuqlik-suyuqlik bo'linish xromatografiyasi), ionlarni ajratish uchun (ion almashinuvi, ion, ion-juft xromatografiya) foydalanish imkonini beradi. makromolekulalarning ajralishi (o'lchamni istisno qilish xromatografiyasi).
1.3. Erituvchining saqlanishi va kuchliligi
Analitik moddalarni ustunda ajratish uchun yuqorida aytib o'tilganidek, sig'im koeffitsienti k" 0 dan katta bo'lishi kerak, ya'ni moddalar statsionar faza, sorbent tomonidan ushlab turilishi kerak. Lekin sig'im koeffitsienti juda ko'p bo'lmasligi kerak. qabul qilinadigan elyusiya vaqtini olish uchun katta bo'ladi.Agar ma'lum moddalar aralashmasi uchun ularni ushlab turuvchi statsionar faza tanlansa, tahlil protsedurasini ishlab chiqish bo'yicha keyingi ishlar ideal holatda boshqacha ta'minlovchi erituvchini tanlashdan iborat. barcha komponentlar uchun, lekin qabul qilinadi juda katta emas k. Bunga erituvchining elutsiya kuchini o'zgartirish orqali erishiladi.

Silikagel yoki alumina ustida adsorbsion xromatografiya o'tkazilganda, qoida tariqasida, ikki komponentli erituvchining kuchi (masalan, izopropanol qo'shilgan geksan) undagi qutb komponentining (izopropanol) miqdorini oshirish orqali oshiriladi. , yoki izopropanol miqdorini kamaytirish orqali kamayadi. Agar qutb komponentining tarkibi juda past bo'lsa (0,1% dan kam), uni zaifroq elutsiya kuchi bilan almashtirish kerak. Xuddi shu narsa qutbli yoki qutb bo'lmagan komponentni boshqalar bilan almashtiradi, garchi bu tizim qiziqish uyg'otadigan aralashma komponentlariga nisbatan kerakli selektivlikni ta'minlamasa ham. Erituvchi tizimlarni tanlashda aralashma komponentlarining eruvchanligi ham, turli mualliflar tomonidan tuzilgan erituvchilarning eluotropik qatori ham hisobga olinadi.

Taxminan xuddi shu tarzda, erituvchining kuchi payvandlangan qutbli fazalarni (nitril, aminokislota, diol, nitro va boshqalar) qo'llashda, mumkin bo'lgan kimyoviy reaktsiyalarni hisobga olgan holda va faza uchun xavfli erituvchilarni hisobga olmaganda tanlanadi (masalan,). , amino faza uchun aldegidlar va ketonlar).
Teskari fazali xromatografiyada erituvchining kuchi eluentdagi organik komponent (metanol, asetonitril yoki THF) miqdorini oshirish orqali oshiriladi va ko'proq suv qo'shilishi bilan kamayadi. Agar kerakli selektivlikka erishib bo'lmasa, boshqa organik komponent ishlatiladi yoki uni turli qo'shimchalar (kislotalar, ion-juft reagentlar va boshqalar) yordamida o'zgartirishga harakat qilinadi.
Ion almashinadigan xromatografiya bilan ajratishda erituvchining kuchi bufer eritma konsentratsiyasini oshirish yoki kamaytirish yoki pH ni o'zgartirish orqali o'zgartiriladi, ba'zi hollarda organik moddalar bilan modifikatsiya qo'llaniladi.
Biroq, ayniqsa, murakkab tabiiy va biologik aralashmalar bo'lsa, ko'pincha barcha namuna komponentlari maqbul vaqt ichida elutsiya qilinadigan tarzda hal qiluvchi kuchini tanlash mumkin emas. Keyin gradient elyusiyasiga murojaat qilish kerak, ya'ni. tahlil paytida elutivlik kuchi oldindan belgilangan dastur bo'yicha doimiy ravishda ortib borishi uchun o'zgarib turadigan erituvchidan foydalaning. Ushbu texnika murakkab aralashmalarning barcha tarkibiy qismlarini nisbatan qisqa vaqt ichida elyusiyaga erishish va ularni tor cho'qqilar shaklida tarkibiy qismlarga ajratish imkonini beradi.