|
3. "Adanol" preparatini standartlashtirish
"Polisan" farmatsevtika kompaniyasi miyaning metabolik jarayonlarini rag'batlantiradigan bir qator murakkab metabolik dorilarni ishlab chiqdi, ular orasida "Cytoflavin" (in'ektsiya, planshetlar) va "Adanol" mavjud. "Adanol" antigipoksik va ishemik xususiyatlarga ega va insult oqibati bo'lgan bemorlarni davolash uchun istiqbolli dori hisoblanadi. Bu ichak qoplamasi bilan qoplangan planshetli dozalash shakli.
U süksin kislotasi (YA), piratsetam (Pc), riboksin (Rb), nikotinamid (NA), piridoksin gidroxlorid (PG), riboflavin mononukleotid (RF) dan iborat.
Ishning maqsadi "Adanol" preparati misolida murakkab ko'p komponentli aralashmalarda UCni sifat va miqdoriy aniqlash usulini ishlab chiqishdan iborat.
Biz Shimadzu (Yaponiya) dan UV detektori va Supelco Inc kompaniyasining Hypersil BDS C18 ustuni bilan yuqori bosimli suyuqlik xromatografidan foydalandik. don hajmi 5 mkm, uzunligi 250 mm, ichki diametri 4,6 mm. Mobil faza fosfat tamponiga (pH 2,6-7,0) asoslangan suv-organik fazadir. Aniqlash to'lqin uzunligi 206 nm. Tahlil rejimi izokratik, elutsiya tezligi 500 µl/min; namuna hajmi 20 µl. UV spektrlari Shimadzu UV mini-1240 spektrofotometrida qayd etilgan.
Preparatni tashkil etuvchi moddalarning ko'p qismini miqdoriy aniqlash uchun spektrofotometrik tahlil usullari taklif qilingan. Shu bilan birga, preparat tarkibiy qismlarining spektral xususiyatlarini taqqoslash shuni ko'rsatdiki, UV zonasida YA, PG, NA, Pb va Pc ning yutilish hududlari bir-birining ustiga chiqadi (1-rasm).
Shu munosabat bilan ularning aralashmadagi tarkibini to'g'ridan-to'g'ri spektrofotometriya bilan aniqlash mumkin emas va bu holda HPLC usulini qo'llash maqsadga muvofiqdir. Faqatgina RF 350 nm dan ortiq o'ziga xos yutilish hududiga ega (lmax=373, E1% 1cm=202 va lmax=445 nm, E1% 1cm=243), shuning uchun u uchun spektrofotometrik usulda sifat va miqdoriy tahlil taklif etiladi. .
Olingan ma'lumotlar asosida 5 ta moddani tahlil qilish uchun optimal ishchi to'lqin uzunligi tanlandi, bu lopt = 206 nm (1-rasmga qarang). Bu qiymat aralashmaning boshqa komponentlari bilan solishtirganda eng past o'ziga xos yutilishga ega (lmax=206 nm E1% 1cm=5,8) UC ning UV spektrining maksimali hisoblanadi (jadvalga qarang).
Preparat tarkibiga kiritilgan barcha moddalar ionogen bo'lganligi sababli, ularni qutbsiz statsionar va qutbli mobil fazalar yordamida tahlil qilish uchun teskari fazali xromatografiyadan foydalanish tavsiya etiladi. Ion birikmalarining teskari fazali xromatografiyasida pH qiymati alohida moddalarni ajratish samaradorligiga sezilarli ta'sir ko'rsatadigan omillardan biridir. Zamonaviy teskari fazali sorbentlar bilan ishlashda odatda mobil fazaning bir qismi sifatida pH 2,0 dan 8,0 gacha bo'lgan bufer eritmalari ishlatiladi. Tanlangan optimal ish to'lqin uzunligi 206 nm bo'lganligi sababli, fosfat tamponidan foydalanish yaxshidir, chunki u 200 nm dan yuqori UV to'lqin uzunligi oralig'ida hech qanday pozitsiyaga ega emas.
Turli xil pH qiymatlarida UC ning harakatini o'rganish uchun uning spektrlari pH 7,0 va 2,6 fosfat bufer eritmalarida olingan (2-rasm). PH 2,6 da UC molekulyar shaklining gipoxromli ta'siri kuzatiladi - so'rilish pH 7,0 spektriga nisbatan 3 baravar kamayadi (bu pH qiymatida UC dissotsiatsiyasi butunlay bostiriladi). Buni hisobga olgan holda, mobil fazaning optimal pH qiymati 7,0 ni tashkil qiladi. Keyinchalik, preparat tarkibiy qismlarini ajratish samaradorligiga mobil fazaning tarkibi va pH ta'siri o'rganildi. PH 2,6 da aralashma alohida cho'qqilarga to'liq ajralmagan - Pc, Na va PG ajralmaydi va birinchi yagona cho'qqi sifatida chiqadi, keyin esa YA va Pb alohida cho'qqilar sifatida chiqadi. pH 5,5 da komponentlarning to'liq ajralishi ham yo'q edi. pH 7.0 da aralashmaning tarkibiy qismlarini to'liq ajratish sodir bo'ldi. Barcha moddalar quyidagi ketma-ketlikda individual cho'qqilar sifatida chiqdi: YA, Pc, PG, NA va Pb. Biroq, ajratish jarayoni uzoq davom etadi - 45-50 daqiqa.
Mobil fazaning ko'proq elutiv kuchini ta'minlash va ajratish jarayonini tezlashtirish uchun uning tarkibiga kamroq qutbli organik erituvchini kiritish kerak. HPLC da elutiv moddalar sifatida eng ko'p ishlatiladigan erituvchilardan biz tanlangan ishchi to'lqin uzunligida (lopt = 206 nm) UV nurida shaffoflik chegarasi bo'yicha asetonitril va metanoldan foydalanishimiz mumkin, ularning shaffoflik chegaralari mos ravishda 195 va 205 nm.
Mobil faza tarkibiga 2% metanolning kiritilishi jarayon vaqtini qisqartirdi, ammo HA cho'qqisi yuqori assimetriyaga ega edi va Pb cho'qqisi HA cho'qqisining dumi ustiga qo'yilgan. Metanol konsentratsiyasini 1% ga tushirgandan so'ng, Pb va HA cho'qqilari bir-biriga mos kelmadi, lekin HA cho'qqisining assimetriyasi oshdi. Uni kamaytirish uchun asetonitril 1% metanolni o'z ichiga olgan mobil fazaga kiritildi.
Tajribalar natijasida mobil faza tanlandi - 1% metanol va 0,5% asetonitrilni o'z ichiga olgan pH 7,0 fosfat tamponidan tashkil topgan suvli-organik faza barcha 5 komponentning samarali ajralishini ta'minladi (3-rasm). Ushbu tizimda umumiy xromatografiya vaqti 35 minutni tashkil etdi va komponentlarni ushlab turish vaqti taxminan (daqiqada): YaK uchun 5,3, Pc uchun 15, PG uchun 19,3, NA uchun 26 va Pb uchun 31.
Miqdoriy aniqlash alohida komponentlarning standart namunalari eritmalaridan foydalangan holda tashqi standart usul bilan amalga oshirildi.
Taklif etilayotgan miqdoriy aniqlash usulining metrologik tavsiflari namunaviy aralashmalar bo'yicha 5 ta takrorlashda o'rganildi va jadvalda keltirilgan.
Jadvaldan ko'rinib turibdiki, "Adanol" preparatida ishlab chiqilgan usuldan foydalanib, 95% ishonchlilik darajasi bilan 3% dan ko'p bo'lmagan nisbiy xatolik bilan barcha 5 komponentni aniqlash mumkin.
Yuqoridagi sharoitlarda olingan xromatogrammada preparatning asosiy tarkibiy qismlarining cho'qqilariga qo'shimcha ravishda, boshlang'ich moddalarda mavjud bo'lgan gipoksantin va nikotin kislotasi cho'qqilari, shuningdek, mos ravishda Pb va NA dan gidrolizlanish jarayonida hosil bo'lgan cho'qqilar aniqlandi. Shunday qilib, ishlab chiqilgan texnika preparatda ushbu begona aralashmalarni sifat va miqdoriy jihatdan aniqlash imkonini beradi.
Do'stlaringiz bilan baham: |
