|
eksperimental qism
AKO Sintez (Qo'rg'on) tomonidan ishlab chiqarilgan Bitsillin-3 ishlatilgan. Tadqiqot Uoters xromatografida (AQSh) 510 modeli nasosi, 481 modeli UV detektori va 50 mkl sig'imli dozalash halqasi bo'lgan 7125 modeli injektori (Rheodyne)da o'tkazildi. Aniqlash uchun 214 nm to'lqin uzunligi ishlatilgan, bunda barcha tahlil qilingan birikmalar yaxshi aniqlanadi. Xromatogrammalarni ro'yxatga olish va tepalik maydonlarini va asosiy ushlab turish parametrlarini hisoblash analog-raqamli konvertorli shaxsiy kompyuter va Multichrome dasturi yordamida amalga oshirildi.
Teskari fazali HPLC usuli Phenomenex (AQSh) kompaniyasining 250 x 4,6 mm o'lchamdagi Luna C18 (2) ustunida o'rganildi, chunki ustun organik omin cho'qqilari hosildorligi simmetriyasi yaxshilanganligi sababli o'zini nisbatan arzon deb isbotlagan edi. Xuddi shu maqsadda harakatchan faza sifatida asetonitrilning komponentlardan biri sifatida trietilaminni o'z ichiga olgan, pH 5,0 bo'lgan bufer eritmasi bilan aralashmasi ishlatilgan.
Mobil fazani tayyorlash uchun dastlabki eritma - 2,5 M fosfor kislotasi eritmasi, u trietilamin bilan pH 5,0 ga titrlangan. Biriktirilgan eritmani 10 marta suv bilan suyultirish orqali HPLC bufer eritmasi tayyorlanadi.Olingan bufer eritmasidan 750 ml 250 ml asetonitril bilan aralashtiriladi. Shu bilan birga, mobil fazaning ko'rinadigan pH qiymati 5,7 ga ko'tarildi. Mobil faza tezligi 1 ml/min. Xromatografiya xona haroratida o'tkazildi. Tahlil vaqti 20 min.
Preparatning tarkibiy qismlari kislota-ishqor xossalari bo'yicha bir-biridan farq qilganligi sababli - BP kislota, novokain va benzatin esa asos bo'lib, pH ning oshishi bilan ularning pH diapazonida ushlab turish vaqtlari, ularning ionlanishi o'zgarib turadi, turli yo'nalishlarga siljiydi. Shuning uchun, pH ni o'zgartirib, tahlil qilingan komponentlarning qulay saqlanishini tanlash oson. Shu bilan birga, pH ning oshishi benzatin cho'qqisi shaklining sezilarli darajada yomonlashishiga olib keladi, pasayish esa novokain va BP gidroliz mahsulotlarining etarli darajada rezolyutsiyasiga olib keladi. Yuqoridagi sharoitda bitsillin-3 komponentlarini ajratish rasmda ko'rsatilgan. Novokain, benzatin va BP ni saqlash vaqtlari mos ravishda 4,2, 11,6 va 14,8 minutni tashkil etdi.
BP gidrolizi mahsuloti bo'lgan 2 tepalik oralig'ida novokainning cho'qqisining chiqishi muhim ahamiyatga ega. Shu munosabat bilan, tarkibiy qismlarni yaxshiroq ajratish uchun mobil fazaga oz miqdorda 2,5 M fosfor kislotasi yoki trietilamin eritmalarini qo'shish va novokain va BP aralashmasini xromatografiya bilan ajratishni nazorat qilish tavsiya etiladi. xona haroratida taxminan bir kun saqlanadi.
Miqdorini aniqlash uchun 100 ml hajmli o'lchov kolbasiga 20-25 mg bitsillin-3 qo'shildi va asetonitrilning 20% suvli eritmasida eritildi. Metanol yoki uning eritmalarini eritish uchun ishlatish BP ning qisman metilatsiyasiga olib keldi. Asetonitril kontsentratsiyasining oshishi novokain cho'qqisining kengayishiga olib keldi. Dori kontsentratsiyasining yuqori chegarasi uning eruvchanligi bilan cheklangan. BP va benzatin uchun kalibrlash chizmalari tegishli konvertatsiyadan so'ng BP va benzatin diasetatning natriy tuzi yordamida olingan. BP uchun kalibrlash egri chizig'i 0,1-0,5 mg / ml mintaqada, benzatin va novokain uchun - 0,01-0,05 mg / ml mintaqada chiziqli. Preparatning 5 seriyasidagi tarkibiy qismlarni aniqlash natijalari 1-jadvalda keltirilgan, bunda har bir qiymat 5 ta ta'rifning o'rtacha ko'rsatkichidir. Nisbiy standart og'ish novokain uchun 1,6%, benzatin uchun 3,4% va BP uchun 1,4% ni tashkil etdi.
1-jadvaldan ko'rinib turibdiki, HPLC yordamida miqdoriy aniqlash natijalari ND tomonidan tartibga solinadigan ruxsat etilgan chegaralarga mos keladi.
Taklif etilgan usulning to'g'riligini tasdiqlash uchun BP, benzatin diasetat va novokainning natriy tuzini aralashtirish yo'li bilan tayyorlangan namunaviy aralashmalarda bitsillin-3 tarkibiy qismlari tahlil qilindi. Natijalar jadvalda keltirilgan.2. Natijalar dastlabki komponentlarga qayta hisoblab chiqiladi.
2-jadvalning "Topilgan" ustunidagi har bir qiymat 3 ta aniqlashning o'rtacha natijasidir. O'rtacha nisbiy og'ish benzatin uchun 2,2%, novokain uchun 0,9% va BP uchun 0,8% ni tashkil etdi, bu haqiqiy namunalardagi komponentlarni tahlil qilishda aniqlangan nisbiy o'rtacha standart og'ishlar bilan bog'liq. Benzatin uchun natijalarning tarqalishi boshqa komponentlarga qaraganda bir oz yuqoriroqdir, bu tepalikning past balandligi va tartibsiz shakli va shunga mos ravishda kattaroq integratsiya xatosi bilan izohlanadi. Benzatinni aniqlashda nisbatan katta xatolarning yana bir sababi kuchli adsorbsiyalangan moddalarni tahlil qilishda injektorning xotira ta'siri bo'lishi mumkin. Biroq, HPLC usuli yordamida tahlil qilish uchun qabul qilinganidan bir oz oshib ketgan bunday tarqalish ham benzatinni aniqlash uchun juda maqbuldir.
Do'stlaringiz bilan baham: |
