Tahlilni xromatografik usullari, tasnifi va sifat tahlilda qo`llanishi

O'zgartirilgan yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi

Ion juftlik xromatografiyasi

Teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasining turlaridan biri bu ion juftlik xromatografiyasi - bu ionlangan birikmalarni aniqlash imkonini beradi. Buning uchun mobil fazaning an'anaviy teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasiga ionogen guruhlarga ega bo'lgan hidrofobik organik birikmalar (ion-juft reagentlar) qo'shiladi. Asoslarni ajratish uchun odatda natriy alkilsulfatlar, kislotalarni ajratish uchun tetraalkilammoniy tuzlari (tetrabutilammoniy fosfat, setiltrimetilammoniy bromid va boshqalar) ishlatiladi. Ion-juft rejimida ion bo'lmagan komponentlarni ajratishning selektivligi teskari fazali ushlab turish mexanizmi bilan cheklanadi, asoslar va kislotalarning saqlanishi sezilarli darajada oshadi, xromatografik cho'qqilarning shakli yaxshilanadi.
Ion-juft rejimida ushlab turish bir-biri bilan raqobatlashadigan juda murakkab muvozanat jarayonlari bilan bog'liq. Bir tomondan, hidrofobik o'zaro ta'sirlar va harakatlanuvchi fazaning qutbli muhitining siljishi ta'siri tufayli, gidrofob ionlarning alkil silikagel yuzasida sorbsiyasi zaryadlangan guruhlar mobil fazaga duch keladigan tarzda mumkin. Bunda sirt ion almashinish xossalariga ega bo`ladi va tutilish ion almashinadigan xromatografiya qonunlariga bo`ysunadi. Boshqa tomondan, to'g'ridan-to'g'ri eluent hajmida ion juftini hosil qilish mumkin, so'ngra teskari fazali mexanizm orqali sorbentga sorbtsiya qilinadi.

Gidrofil o'zaro ta'sir xromatografiyasi ( HILIC xromatografiya)

Gidrofil o'zaro xromatografiya teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida yomon saqlanadigan qutbli birikmalarni ajratish uchun ishlatiladi. Xromatografiyaning ushbu variantida harakatchan faza sifatida tuzlar, kislotalar yoki asoslar qo'shilgan suv-asetonitril aralashmalari qo'llaniladi. Statsionar fazalar, qoida tariqasida, polar guruhlar (amino, diol, siyanopropil guruhlari va boshqalar) bilan o'zgartirilgan silika jellaridir. Ko'proq qutbli birikmalar kuchliroq tutiladi. Mobil fazaning elutsiya kuchi ortib borayotgan polarit bilan ortadi.

Ion almashinuvi va ion yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi

Ion almashinuvi xromatografiyasi ham organik (geterotsiklik asoslar, aminokislotalar, oqsillar va boshqalar), ham noorganik (turli kationlar va anionlar) birikmalarini tahlil qilish uchun ishlatiladi. Tahlil qilinayotgan aralashmaning tarkibiy qismlarini ion almashinadigan xromatografiyada ajratish tahlil qilinayotgan moddalar ionlarining sorbentning ion almashinadigan guruhlari bilan teskari o'zaro ta'siriga asoslangan. Bu sorbentlar asosan polimerik ion almashinadigan qatronlar (odatda payvandlangan ion almashinadigan guruhlarga ega stirol va divinilbenzolning sopolimerlari) yoki payvandlangan ion almashinadigan guruhlarga ega silikagellardir. Guruhli sorbentlar: -NH 3 +, -R 3 N +, -R 2 HN +, -RH 2 N + va boshqalar anionlarni (anion almashinuvchilarni) ajratish uchun, va guruhlari bo'lgan sorbentlar: -SO 3 -, - Kationlarni ajratish uchun RSO 3 -, -COOH, -PO 3 - va boshqalar (kation almashinuvchilar).
Ion almashinadigan xromatografiyada harakatlanuvchi faza sifatida kislotalar, asoslar va tuzlarning suvli eritmalari ishlatiladi. Odatda, bufer eritmalari ma'lum pH qiymatlarini saqlab qolish uchun ishlatiladi. Suv bilan aralashadigan organik erituvchilar - asetonitril, metanol, etanol, tetrahidrofuranning kichik qo'shimchalaridan ham foydalanish mumkin.