Амфифильные додецил-олигонуклеотидные конъюгаты
как потенциальные средства для доставки нуклеиновых кислот в клетки
Павлова А.С., Купрюшкин М.С., Довыденко И.С., Григорьева А.Е., Пышная И.А.,
Пышный Д.В.
Институт Химической Биологии и Фундаментальной Медицины СО РАН,
Новосибирск, Россия
Использование синтетических конъюгатов нуклеиновых кислот (НК), содержащих
остатки липидов или алифатических углеводородов, является одним из способов
улучшения проникновения функционально значимых НК-конструкций в клетки [1-2].
Данные соединения характеризуются хорошей биологической совместимостью и вслед-
ствие своей амфипатичности способны к самоассоциации в водных растворах с обра-
зованием мицеллоподобных структур, как правило, сферической формы, чем пред-
ставляют особенный интерес для исследователей [3].
В данной работе исследованы особенности самоассоциации олигодезоксири-
бонуклеотидов и их фосфорилгуанидиновых производных, содержащих на 5’- или
3’-конце додецильные группировки [4]. С помощью методов динамического рассеяния
света, атомно-силовой и просвечивающей электронной микроскопии показано, что
додецил-олигонуклеотидные конъюгаты (ДОК) в зависимости от условий способны к
формированию мицеллоподобных структур, как сферической формы от 30 нм в диа-
метре, так и агрегатов большего размера. Продемонстрировано высокое сродство ДОК
к белкам (на примере бычьего сывороточного альбумина) по сравнению с олигонук-
леотидами, не содержащим гидрофобных додецильных группировок. Показано, что
в условиях формирования мицеллоподобных структур интенсивность флуоресценции
остатка 6-FAM, введённого в ДОК в различные положения относительно додецильных
группировок, может значительно снижаться. Методом конфокальной микроскопии
продемонстрирована способность ДОК к проникновению в клетки линии 143В.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о перспективах дальнейших
разработок средств доставки НК-конструкций в клетки с использованием додецил-оли-
гонуклеотидных производных.
1. Karaki S., Benizri S., др. всего 10 человек. Lipid-oligonucleotide conjugates improve cel-
lular uptake and efficiency of TCTp-antisense in castration-resistant prostate cancer //
J. Control. Release. - 2017. - V. 258. - p 1-9.
2. Dovydenko I., Venyaminova A., др. всего 5 человек. Modifications in therapeutic oligo-
nucleotides improving the delivery. In: Modified Nucleic Acids in Biology and Medicine.
RNA Technologies. Springer, Cham // 2016. - p 319-337.
3. Shu Y., Yin H., др. всего 8 человек. RNA-based micelles: a novel platform for paclitaxel
loading and delivery // J. Control. Release. - 2018. - V. 276. - p 17-29.
4. Kupryushkin M., Nekrasov M, др. всего 4 человека. Efficient functionalization of oli-
gonucleotides by new achiral nonnucleosidic monomers // Org. Lett. - 2014. - V. 16. -
p 2842-2845.
Павлова А.С. выражает благодарность к.х.н. Шевелёву Г.Ю. за полезные консультации по
проведению АСМ-анализа.
Исследование проведено при поддержке гранта РНФ № 18-14-00357.
Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
49
Do'stlaringiz bilan baham: |