Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Изучение структурных и агрегационных свойств фрагмента к-казеина RL2
Овчеренко С.С.
1
, Шернюков А.В.
1
, Чинак О.А.
2
, Багрянская Е.Г.
1
1
Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН, 
Новосибирск, Россия 
2
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,
Новосибирск, Россия
Фрагмент человеческого к-казеина – RL2 способен проникать в человеческие клет- 
ки и, взаимодействуя с белками цитоскелета (α- и β-тубулином и α-актинином I),
индуцировать апоптотическую смерть раковых клеток. На основе RL2 был разрабо- 
тан терапевтический агент «Лактаптин», доклинические испытания которого были 
успешно завершены.
Казеины относят к IDP, белкам с неупорядоченной структурой, для которых 
существуют специальные методы исследования. Одним из наиболее информативных 
методов высокого разрешения является метод ЯМР [1]. Мы исследуем фрагмент 
человеческого к-казеина – рекомбинантный белок RL2, который содержит 66.5% его 
аминокислотной последовательности (положение аминокислот 24-134) и дополни-
тельно содержит His-tag - GGSHHHHHH на C-конце и метионин на N-конце.
В настоящей работе структурные и агрегационные свойства рекомбинантного 
белка RL2 были охарактеризованы комбинацией методов динамического светорас-
сеяния (ДС), атомно силовой микроскопии (АСМ), ЯМР, а также ЭПР. Установлено, что 
в растворе RL2 присутствует в виде смеси отдельных мономеров с присоединенным 
по S-S связи к единственному остатку в полипептидной цепи 8Cys соединением - 
β-меркаптоэтанолом (BME), ковалентных димеров, образованных за счет S-S связи по 
8Cys, и агрегатов большого размера. Была исследована динамика основной цепи RL2. 
Сопоставление полученных ЯМР данных позволяет выделить более упорядоченный 
участок основной цепи RL2 на N конце (1-43 остатки), который важен для цитотокси-
ческого действия RL2, а также область (30-41 остатки) со склонностью к образованию 
альфа-спирали. Установлено, что модификация 8Cys BME или MTSL-спиновой меткой 
значительно не влияет на структуру белка по сравнению с RL2 со свободным цистеином.
1. Felli I. C., pierattelli R. (ed.). Intrinsically disordered proteins studied by NMR spectros-
copy. - Springer, 2015. - T. 870.
Исследование было поддержано грантом - Министерство образования и науки Россий-
ской Федерации (state contract no. 14. W03.31.0034).

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
199