Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Характеризация хвостовых белков бактериофагов 
Proteus mirabilis
с целью создания бактериофага с расширенным спектром хозяев
Боковая О.В.
1,2
, Морозова В.В.
1
, Бабкин И.В.
1,2
, Козлова Ю.Н.
1
, Тикунова Н.В.
1,2
1
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новоси-
бирск, Россия 
2
Новосибирский государственный национальный исследовательский университет, 
Новосибирск, Россия
proteus mirabilis
– это грамм-отрицательный бактериальный патоген. Известно, что 
у некоторых штаммов рода 
proteus 
возникает устойчивость к антибиотикам. Коктейли 
бактериофагов против лекарственно-устойчивых штаммов 
proteus mirabilis
могут 
быть использованы как биологическая альтернатива использованию антибиотиков. 
Однако использование бактериофагов для лечения бактериальных инфекций имеет 
свои недостатки. Зачастую бактериофаги обладают узким спектром бактерий-хозяев, 
что затрудняет их использование. Возможным выходом из этой ситуации является 
создание бактериофагов с расширенным спектром бактерий-хозяев.
Ранее в Лаборатории молекулярной микробиологии ИХБФМ СО РАН были 
выделены 5 литических бактериофагов, специфичных к некоторым штаммам патогенных 
бактерий 
proteus mirabilis
. Было проведено полногеномное секвенирование бактерио-
фагов, и проведена аннотация геномов. Биоинформатический анализ показал, что в гено- 
мах фагов PM93 и PM85 содержится по две ОРТ, предположительно кодирующие хвос- 
товые белки с потенциальной деполимеразной активностью. В геномах фагов PM16, 
PM116 и PM75 было найдено по одной ОРТ, кодирующей подобные белки. Для харак-
теризации этих белков были получены генетические конструкции в плазмиде Pet28b+, 
содержащие последовательности соответствующих фаговых генов.
Пять генетических конструкций, кодирующих рекомбинантные хвостовые белки 
фагов PM93, PM85 и PM75 были получены. Индукция синтеза белка с полученных 
конструкций показала, что все белки присутствуют как в растворимой цитоплазма-
тической фракции, так и в нерастворимой. Рекомбинантные белки были наработаны, 
и была произведена их хроматографическая очистка на колонке с сорбентом Ni-NTA. 
Удалось очистить четыре белка: P93GP46, P93GP47, P85GP47 и P75GP46. Проведены 
предварительные эксперименты на способность деградировать поверхностный полиса-
харидный матрикс хозяйских штаммов 
proteus mirabilis
. Показано, что рекомбинантные 
белки P93GP47 и P75GP4 обладают полисахарид-деградирующей активностью.
Работа выполнена при поддержке Фонда РФФИ, проект № 18-29-08015 «Разработка спосо-
бов создания геномов искусственных бактериофагов для контроля патогенных бактерий».

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
151