С. А. Эгамбердиева молекуляр

I, 
Bam
HI ва 
Pst
I учун ноёб 
таниш сайтлари мавжуд
. Eco
RI-
сайти мазкур генлардан ташқарида 
жойлашган. Вектор узунлиги – 4361 
н.ж. (Глик ва Пастернак бўйича). 
Бундай молекулалар керакли генни сақлаган ва айнан шундай 
рестриктаза 
билан 
ишлов 
берилган 
донор 
ДНК 
билан 
аралаштирилади. Модомики, бу иккала ДНК ёпишқоқ учлари ўзаро 
комплиментар бўлса, улар гибрид молекулалар ҳосил қилиб 
жуфтлашадилар. Кейинчалик аралашмага АТР иштирокида Т4 фаг 
ДНК-лигазаси билан ишлов берилади, натижада фрагментларнинг 
кўпгина турли хил комбинациялари, шунингдек номақбул 

---

58 
маҳсулотлар, хусусан донор ДНК ва дастлабки плазмид ДНКнинг бир 
бири билан ўзаро бирлашган фрагментлари ҳосил бўлади. Мазкур 
бирлашган фрагментлар сонини камайтириш учун рестрикцияланган 
плазмид ДНКга линеаризирланган (чизиқли) молекуладан 5'-фосфат 
гуруҳини ажратадиган ишқорий фосфатаза билан ишлов берилади: 
ДНК-лигаза дефосфорирланган чизиқли плазмид ДНК учларини 
бирлаштира олмайди (расм 7.2).
Хусусан ДНК рекомбинант молекулаларига келсак, уларда 
иккита бир занжирли узилишлар бўлса ҳам, уларнинг фрагментлари 
ДНК-лигаза ёрдамида дефосфорилирланган плазмид ДНК ва 
рестрикцияланган донор ДНК орасида ҳосил бўлган иккита 
фосфодиэфир боғламлари билан бирга ушлаб турилади (расм 7.2). 
Трансформацияланган ҳужайрада репликациядан кейин бир 
занжирли узилишлар ҳужайра-хўжайиннинг лигирлаш (улаш) тизими 
орқали бартараф этилади. 
Расм 
7.2. 
Плазмида 
векторига бегона ДНКни 
ўрнатиш. Рестриктаза ва 
ишқорий фосфатаза билан