Производство иммунобиологических лекарственных препаратов Производство противобактериальных вакцин и бактериальных антигенов-диагностикумов

Технологии получения вакцин

Получение вирусных вакцин. Заражение монослоя клеточной культуры производят сразу после его формирования. Ростовую среду с соблюдением правил асептики сливают, клеточный монослой 2 – 3 раза промывают стерильным фосфатно-буферным раствором. При этом удаляют продукты метаболизма клеток и сывороточные белки, которые могут ингибировать репродукцию вируса. Затем вносят вируссодержащий материал и оставляют его на 1-4 часа при температуре от 25 °С до 37 °С для адсорбции. В течение этого времени происходит первая фаза заражения клеточной культуры - максимальная адсорбция вирусов на клеточных мембранах.

Затем вируссодержащую суспензию сливают, промывают стерильным фосфатно-буферным раствором для удаления остатков вируссодержащего материала, и монослой заливают поддерживающей (более бедной в сравнении с ростовой) средой. После чего емкости с зараженным монослоем закрывают стерильными пробками и помещают в термостат при температуре 37 °С. Контроль заражения культуры клеток вирусом осуществляют микроскопически в сравнении с интактными, т.е. незараженными вирусом клетками.

Технологии получения вирусных вакцин

• В процессе производства вирусных препаратов возникает необходимость контроля за накоплением вирусных частиц, отсутствием контаминации бактериями, грибами, микоплазмами, посторонними вирусами.
• Вирусные частицы нельзя увидеть и сосчитать, пользуясь световым микроскопом, вырастить в макроскопически видимые колонии на питательных средах, используя микроскопические и бактериологические методы исследований.
• Однако опосредованно, о процессе репликации вирусных частиц в любой биологической модели, будь-то культивирование в организме животного, в развивающихся эмбрионах птиц или культуре клеток, можно судить по цитопатогенному действию (ЦПД) вирусов или цитопатическому эффекту, появлению внутриклеточных включений, образованию бляшек, реакциям гемадсорбции и гемагглютинации, цветной реакции.

Технологии получения вирусных вакцин

• В процессе производства вирусных препаратов возникает необходимость контроля за накоплением вирусных частиц, отсутствием контаминации бактериями, грибами, микоплазмами, посторонними вирусами.
• Вирусные частицы нельзя увидеть и сосчитать, пользуясь световым микроскопом, вырастить в макроскопически видимые колонии на питательных средах, используя микроскопические и бактериологические методы исследований.
• Однако опосредованно, о процессе репликации вирусных частиц в любой биологической модели, будь-то культивирование в организме животного, в развивающихся эмбрионах птиц или культуре клеток, можно судить по цитопатогенному действию (ЦПД) вирусов или цитопатическому эффекту, появлению внутриклеточных включений, образованию бляшек, реакциям гемадсорбции и гемагглютинации, цветной реакции.
• По завершении технологического процесса промышленного культивирования вирусов для последующего изготовления иммунобиологических препаратов проводят титрование полученного вируссодержащего материала.
• Наряду с определением концентрации вирусных частиц, вируссодержащий материал исследуют на отсутствие микроорганизмов контаминантов (бактерий, грибов и посторонних вирусов), а затем, при необходимости, подвергают инактивации, выделению вирусных антигенов и очистке.