Практическое занятие №1

7. План занятия.

1. 
   Введения. Осветить значимость темы, перечень вопросов.
   
2. 
   Разбор вопросов:
   

1. 
   Вопрос № 1. Функции крови, химический состав крови.
   
2. 
   Вопрос № 2. Белки плазмы крови.
   

1. 
   Альбумины
   
2. 
   Глобулины
   
3. 
   Транспортные белки
   

3. 
   Вопрос № 3. Роль альбуминов в транспортировке воды
   
4. 
   Вопрос № 4. Эритроциты и гемоглобин. Синтез гемоглобина и ее регуляция.
   
5. 
   Вопрос № 5. Обмен железы.
   

3. 
   Резюме педагога по теоретическим вопросам занятия.
   
4. 
   Решение ситуационных задач, ролевые игры, тесты.
   
5. 
   Практическая часть. Лабораторная работа: Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови (метод Бесия и Лоури).
   
6. 
   Оценка занятий студентов.
   
7. 
   Объяснение темы следующего занятия.
   

Лабораторная работа.
«Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови (метод Бесия и Лоури)».
Щелочная фосфатаза катализирует отшепление фосфорной кислоты от эфиров с органическими соединениями. Оптимум рН 8,6-10,1. Щелочная фосфатаза преимущественно сосредоточена в костной ткани, слизистой оболочке кишечника, почках и печени.
Определение ее в сыворотке крови имеет клинико-диагностическое значение. Активность щелочной фосфатазы резко повышается в сыворотке при рахите, остеомаляции, остеосаркомах, при заболиваниях печени. В некоторых случаях повышение активности щелочной фрсфатазы судят по количеству п-нитрофенола, образующенося при гидролиза п-нитрофенилфосфата поддействием фермента.

Ход работы. Готоят две пробирки для опытной и контрольной проб. В обе пробирки вносят по 1 мл субсратно-буферного раствора. Пробы помешают в термостат при 37⁰С на 5 мин. Затем в опытную пробу добавляют 0,1 мл сыворотки и смесь тшательно перемещивают.
Опытную и контрольную пробы ингибируют в термостате при 37⁰С в течение 30 мин, а затем переносят в банию со льдом. После охлаждения в контрольную пробу вносят 0,1 мл 10 мл раствора NaOH.
Через 5 мин пробы измеряют на ФЭКе с фиолетовым светофильтром (длина волны 400-420 нм).
Расчет делают по колибровочному графику. Активность фермента выражают в макромолях п-нитрофенола, освобожденного 1 мл сыворотки за 1 ч инкубации.
В норме активность щелочной фосфотазы в сыворотке крови равна 1,0-4,0 мкмоль/мл час.