Практическое занятие №1

Лабораторная работа.
«Анализ желудочного сока».
Желудочный сок представляет собой бесцветную жидкость с сильнокислой реакцией (рН 1,5-2). За сутки у человека отделяется около 1,5 л желудочного сока, в его состав входят вода, белки. Ферменты (пепсин, гастриксин), лизцин, соляная кислота, кислорегулирующие фосфаты и ряд других веществ.
Кислая реакция желудочного сока обусловлена присуствии соляной кислоты, кислорегирующих фосфатов, а при патологических процессах – молочной кислотой и мутными кислотами. Совокупность всех кислорегирующих веществ желудочного сока обычно называет общей кислотностью. Соляную кислоту, связанную с белками и продуктами их переваривания называют связанной соляной кислотой, а остающуюся в избытке соляную кислоту называют свободной соляной кислотой. При различных заболеваниях могут меньятся как количество отделянного желудочного сока, так и содержание в нем соляной кислоты и ферментативная широко используется методы анализа желудочного сока, играющие важную роль в диагностике и лечении многих заболеваний желудочно-кишечного тракта.
При анализе желудочного сока определяют общее количество его, цвет, запах, наличие слизи, общую кислотность, свободную соляную кислоту, связанную соляную кислоту, присутствие в соке молочной кислоты, желчи и крови.
а) Цветная реакция на свободную соляную килоту. На бумагу конго стекляной палочкой каплю 0,2%-ного раствора соляной кислоты в месте нанесения появляется синее окрашивание. Повторяют эту реакцию с желудочном соком: в месте нанесения капли жуледочного сока на бумагу конго появляется синее окрашивание, обусловленное присуствием свободной соляной кислоты в желудочном соке.
2. В одну пробирку добавляют несколько капель раствора НСl, в другую -несколько капель желудочного сока, затем в обе пробирке добавляют по 1-2 капли раствора диметиламиноизобензола. В обеих пробирках наблюдают появлению вишнево-красной окраски.
б) Реакция на молочную кислоту (реакция Уффельмона). Реакция на молочную кислоту основано на ее способности образовывать с солями трехвалентного железа лактат желаза (III), при этом раствор окрашивается в желто-зеленный цвет.
Ход работы. 1. В одну пробирки наливают по 20 капель 2%-ного раствора фенола и добавляют по каплям 1%-ный раствор хлорида железа (III) до появления фиолетового окрашивания.
2. К полученному реактиву добавляют по каплям в первую пробирку сок, содержащий молочную кислоту и пониженное количество соляной кислоты, во вторую - нормальный желудочный сок.
3. В первой пробирке появляется желто-зеленое окрашивание, во второй окраска исчезает, так как соляная кислота вызывает обеспечивание раствора.
б) Реакция на крови с бензидином.
Реакция основана на окислении бензидина кислородом, образовавшийся при разложении пероксида водорода под действием Нв крови.
Ход работы. В пробирку отмеривают 1 мл желудочного сока, добавляют 4-5 капель 0,2%-ного спиртового раствора бензидина и 5 капель 1%-ного раствора пероксида водорода. Если желудочный сок содержит кровь, то в результате окисления бензидина до п-хиноидинмида развивается синее окрашивание.