Лабораторная работа.
«Определение общего холестерина в сыворотке крови по методу Илька».
Содержание общего холестерина в сыворотке крови здорового человека колеблется в пределах 150-250 мг/дл (среднее значение 200 мг/дл). На эфиры холестерина с жирными кислотами приходится 60 – 70% от общего холестерина и 30-40% - на свободный холестерин. В сыворотке крови отношение свободного холестерина к эфиросвязанному - величина постоянная.
Увеличение содержания холестерина в плазме крови (гиперхолестеринемия) наблюдается при микседеме, менингитах, диабете, атеросклерозе, при некоторых заболеваниях печени. Описана также наследственная гиперхолестеринемия.
Снижение содержание холестерина в плазме (гипохолестеринемия) отмечается при хронической сердечной недостаточности, острых инфекционных заболеваниях, острых панкреатитах, гипертиреозе.
Метод основан на том, что холестерин в присутствии уксусного ангидрида и смеси уксусной и серной кислот образует окрашенные продукты, интенсивность окраски которых определяется колориметрически.
Ход раборы. В сухую пробирку (присутстие следов воды мешает развитию окраски) вносят 2 мл рабочего реактива (реактив отмеривают стеклянным цилиндром) и 0,1 мл негемолизированной сыворотки. Сыворотку добавляют медленно, так, чтобы она стекала по стенке пробирки. Пробирку энергично встряхивают 10-12 раз и помещают в термостат при 370С на 20 мин.
Для приготовления контрольной пробы (одна-две пробы на группу) в сухую пробирку отмеривают 2 мл рабочего реактива.
Окраску растворов измеряют на ФЭКе против контроля с красным светофильтром.
Содержание холестерина в пробах определяют по калибровочной кривой.
Практическое занятие № 24.
Тема: Регуляция и нарушение липидного обмена.
4. Цель: Изучить механизмы резервирования и мобилизации жиров и их регуляции. А также нарушения липидного обмена: гиперхолестеринемия и ее роль в развитии атеросклероза, желчекаменную болезнь: биохимические основы ее развитие и методы ее лечения, кетонемия, кетонурия, гиперлипидемия, ожирение, сфинголипидоз.
5. Задача.
После проведение занятия студенты должны знать:
Определению общих липидов в сыворотке крови;
Определению общего холестерина в сыворотке крови;
Определению β- липопротеидов в сыворотке крови;
Умению на основании полученных лабораторных показателей, грамотно ставить диагноз.
Do'stlaringiz bilan baham: |