Структура и функции белков и пептидов

ЭТАПЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПЕРВИЧНОЙ СТРУКТУРЫ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ 
1.
Выделение белка из смеси в чистом виде (по одному из признаков: размер моле-
кулы, заряд, специфическое сродство связывания).
2.
Определение молекулярной массы. 
3.
Определение N-концевой АК. 
4.
Определение С-концевой АК. 
5.
Определение АК-последовательности белковой цепи. 
Выделение белка из биологического материала
основано на его физико-химических 
свойствах. Чаще всего для этих целей используют кислотно-основные свойства белков (ам-
фотерность, заряд молекулы, изоэлектрическое состояние). От заряда белковых молекул за-
висит их: 

растворимость (минимальна в изоэлектрическом состоянии); 

электрофоретическая подвижность; 

структура и биологическая активность. 
При растворении в водной среде на поверхности белковой молекулы 
формируется
гидратная оболочка
.
Устойчивость белка в растворе
зависит от: 
1)
заряда белковой молекуы; 
2)
наличия гидратной оболочки; 
3)
молекулярной массы белка. 
Таким образом, по физико-химическим свойствам, положенным в основу метода раз-
деления, выделения или очистки белка, методы можно сгруппировать в следующем виде: 
Растворимость 
белка 
Заряд белка 
Размеры 
(молекулярная
масса) белка 
Биологическая
активность белка 
(способность
связываться
с лигандами) 
Высаливание 
Осаждение 
Электрофорез 
Иэоэлектрофо-
кусирование 
Ионообменная 
хроматография 
Высаливание 
Диализ 
Гель-хроматография 
Ультрацентрифугиро-
вание 
Аффинная
хроматография 
Иммуноэлектрофорез 
(Вестерн-блот)