Генетика, геномика ва биотехнологиянинг замонавий муаммолари

МЕТИЛИРОВАНИЕ ГЕНА МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ 
УСТОЙЧИВОСТИ ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ - МАРКЕР 
ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ. 
 
Кадырова Д.А., Авезов Н.Ш., Абдугафурова Д.Г., Зиямухамедова С.А. 
Институт биоорганической химии АН РУз 
100125,Узбекистан, г. Ташкент, ул. Мирзо-Улугбека 83 
[e-mail] 
Экспрессия гена МЛУ MDR1 часто связана с клинически не-
благоприятным прогнозом онкологических заболеваний. Известно, что 
метилирование ДНК в регуляторно-промоторной области гена часто ведет к 
инактивации данного гена и наоборот. Ярким примером последней ситуации 
является связь между гипометилированием гена MDR1 и повышением его 

---

Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г. 
17 
экспрессии. Метилирование промоторных регионов генов является одним из 
основных механизмов эпигенетической регуляции экспрессии генов. В 
опухоли молочной железы уже на ранних стадиях онкогенеза наблюдается 
общее гипометилирование генома, которое способствует малигнизации. 
Определение уровня метилирования промоторных участков гена MDR1 
в опухоли молочной железы до лечения и после неоадъювантной 
химиотерапии (НАХТ). 
В качестве объекта для исследований были использованы образцы 
биопсийного материала и кровь пациенток с диагнозом РМЖ (46 больных), 
до лечения и после 2 курсов неоадъювантной химиотерапии (НАХТ). Возраст 
больных находился в пределах 30 - 76 лет. Диагноз РМЖ у всех больных был 
морфологически верифицирован. В качестве контроля была использована 
кровь здоровых доноров – добровольцев (12 доноров). 
Метилирование 
исследовалось 
при 
помощи 
метода 
метилчувствительной ПЦР. Метилчувствительная полимеразная цепная 
реакция (МЧ-ПЦР) основана на использовании рестрикционных эндонуклеаз, 
чувствительных и нечувствительных к метилированию остатков цитозина. 
Для 
анализа 
метилирования 
конкретных 
специфических 
последовательностей 
можно 
использовать 
метилчувствительные 
рестриктазы, наиболее эффективными являются часто щепящие HpaII и 
HhaI., т.к. районы CpG-островков имеют множество сайтов их узнавания, что 
практически устраняет возможность неполного гидролиза ДНК. Если 
фрагмент ДНК не содержит модифицированных оснований, то гидролиз 
проходит полностью, ПЦР не происходит и, соответственно, ее продукт не 
определяется. В то же время, если в сайте узнавания рестриктазы вместо 
цитозина присутствует метилцитозин, то гидролиз не происходит, и в геле 
выявляется фрагмент определенной длины. В качестве матрицы для 
полимеразной цепной реакции использовали ДНК, полученную из 
лейкоцитов крови пациентки, предварительно гидролизованную метил-
чувствительной рестриктазой HpaII (CCGG). В результате установлено, что 

---

Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г. 
18 
гипометилирование промоторных регионов гена MDR1 сочетается с их 
высокой экспрессией до лечения и повышением экспрессии в процессе 
НАХТ. Экспрессия гена МЛУ часто связана с неблагоприятным прогнозом и 
в свою очередь коррелирует с аномальным гипометилированием гена MDR1. 
Было показано, что у 26 больных (56,5%) наблюдается гипиметилирование 
промоторной области гена MDR1, что ведет к повышению функциональной 
активности Р-гликопротеина, что указывает на то, что у этих больных низкая 
эффективность лечения. 
Таким образом, гипометилирование через упомянутое выше повышение 
экспрессии гена MDR1 провоцирует прогрессирование заболевания в ответ 
на применение НАХТ, тогда как гиперметилирование посредством 
ингибирования активности данного гена способствует лучшим показателям 
лечения и стабилизация опухолевого процесса