Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
40
ГЕНОТИПИРОВАНИЕ ХРОМОСОМ-ЗАМЕЩЕННЫХ ГИБРИДОВ
ХЛОПЧАТНИКА С ПОМОЩЬЮ МОЛЕКУЛЯРНОГО АНАЛИЗА
Санамьян М.Ф., Бобохужаев Ш.У., Макамов А.Х., Ачилов С.Г.,
Абдурахмонов И.Ю.
Национальный университет Узбекистана им. М.Улугбека
100134, Узбекистан, Ташкент, Вузгородок
Центр геномики и биоинформатики АН РУз
sanam_marina@rambler.ru
Как известно, в последние годы широкое развитие получили
исследования по хромосомной приписке молекулярных микросателлитных
локусов (SSR-маркеров) при помощи гипоанеуплоидных замещенных
гибридов. Такие молекулярно-генетические исследования проводятся в
Узбекистане, что позволило выделить, клонировать и изучить маркеры,
ассоциированные с важнейшими хозяйственно-ценными признаками.
С целью создания новых хромосом-замещенных линий хлопчатника, мы
скрещивали моносомные линии Цитогенетической коллекции Национального
университета Узбекистана, созданной в единой генотипической среде линии Л-
458 вида
G. hirsutum
, с линией Pima 3-79 (USA) вида
G. barbadense
L.
Последняя была получена в результате спонтанного удвоения хромосом у
гаплоидного растения. Среди гибридной популяции F
1
цитогенетическим
анализом выделяли моносомные межвидовые хромосом-замещенные
гибриды. Для хромосомной приписки использовались микросателлитные
маркеры хлопчатника, имеющиеся в коллекции Центра геномики и
биоинформатики АН РУз. Эти маркеры были специфичными к 26
негомологичным хромосомам
G. hirsutum
по четыре полиморфных маркера
на каждую хромосому. В результате молекулярно-генетического анализа
двух моносомных межвидовых хромосом-замещенных гибридов F
1
(Мо58хPima 3-79 и Мо60хPima 3-79) было обнаружено присутствие
полиморфных аллелей только от вида
G. barbadense
, тогда как аллели линии
Л-458 вида
G. hirsutum
отсутствовали, что указало на локализацию трех
хромосом специфичных SSR маркеров (BNL2572, CIR249 и GH-117) на
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
41
соответствующих моносомах. Поскольку известно картирование этих
маркеров на хромосоме 4 A
t
-субгенома хлопчатника, можно считать, что
две моносомные линии (Мо58 и Мо60) являются дубликатами и имеют
нехватку по хромосоме 4 A
t
-субгенома хлопчатника. Наряду с
шестнадцатью моносомными линиями – Мо7, Мо31, Мо38, Мо59, Мо66,
Мо69, Мо70, Мо71, Мо72, Мо73, Мо75, Мо76, Мо79, Мо81, Мо89 и Мо90
нашей Цитогенетической коллекции, ранее приписанными к той же
хромосоме генома, выясняется более частой появление хромосомы 4 в
качестве нехваток отдельных хромосом внутри A
t
-субгенома хлопчатника.
Молекулярно-генетический анализ другого моносомного межвидового
хромосом-замещенного гибрида F
1
(Мо92хPima 3-79) и одной
монотелодисомной линии с нехваткой одного из плеч хромосомы
(тело12хPima 3-79) с помощью двух хромосом специфичных маркеров
(TMB0853 и TMB1277) также указал на присутствие только полиморфных
аллелей
G. barbadense
, тогда как аллели линии Л-458 отсутствовали. Так как,
ранее эти маркеры были локализованы на хромосоме 6 A
t
-субгенома
хлопчатника, можно считать, что моносомная линия Мо92 и одна
монотелодисомная линия тело12 Цитогенетической коллекции имеют
нехватку по хромосоме 6 и нехватку одного из плеч хромосомы 6 A
t
-
субгенома хлопчатника, соответственно. Поскольку ранее в результате
генотипирования с помощью молекулярного анализа восьми хромосом
специфичных маркеров (BNL1064, BNL2884, BNL3650, CIR203, Gh032,
Gh039, Gh082 и TMB1538) еще две моносомные линии Мо13 и Мо67 были
приписанны к хромосоме 6 А
t
-субгенома хлопчатника, можно считать, что
хромосома 6 А
t
-субгенома хлопчатник не часто регистрируется в виде
моносом, полученных в результате применения нескольких видов
радиации, а также в потомствах растений с десинаптическим эффектом.
Однако, генотипирование с помощью SSR-маркеров не позволило
идентифицировать нехватки отдельных хромосом у 12 моносомных линий
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
42
Цитогенетической коллекции хлопчатника, что требует использования в
экспериментах других наборов хромосом специфичных маркеров.
Do'stlaringiz bilan baham: |