П. И. Гунькова общая и пищевая микробиология часть I учебное пособие

4. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ 
Цель работы:
дать представление о разновидностях питатель-
ных сред, используемых для выращивания микроорганизмов; озна-
комить студентов с методами посева и пересева микроорганизмов. 
Выращивание микроорганизмов на питательных средах назы-
вают культивированием (от лат. 
cultus
– выращивание), а развивши-
еся при этом микробы – культурой. Различают 
чистую
культуру, яв-
ляющуюся потомством клеток только одного вида; 
накопительную
культуру, в которой преобладают клетки одного вида или группы 
родственных микроорганизмов, и 
смешанную
культуру, представля-
ющую собой консорциум нескольких видов микроорганизмов. 
Внесение какого-либо исследуемого материала (пробы воды, 
продукта, образца почвы и т.д.) в стерильную питательную среду 
называется 
посевом
. Перенесение уже выращенной культуры в сте-
рильную среду называется 
пересевом
, а при многократных пересевах – 
пассированием
(от лат. 
passis
– чередование). 
При культивировании микроорганизмов важно создать опти-
мальные условия для их роста. Основными факторами, влияющими 

---

31
на скорость роста, являются температура, рН среды, наличие или от-
сутствие кислорода, состав и свойства среды. 
Микроорганизмы выращивают при оптимальной для каждого 
из них температуре в термостатах или термостатных комнатах. Этот 
процесс называется 
инкубацией
, или 
инкубированием
(от лат. 
incuba-
tio
– выращивание, высиживание птенцов). В частности, мезофиль-
ные микроорганизмы выращивают при температуре от 25 до 30 °С, 
термофильные – при температуре 40–45 °С, бактерии группы кишеч-
ной палочки – обычно при температуре 37 °С. 
Микроорганизмы весьма требовательны к реакции среды. Поэто-
му до стерилизации необходимо установить требуемое значение рН сре-
ды с учетом снижения его на некоторую величину после стерилизации.
Культивирование микроорганизмов в лабораторных условиях 
осуществляют в стеклянной посуде: колбах, пробирках, чашках Пет-
ри, матрацах (плоских стеклянных бутылях), в жидкой среде (буль-
оне), в молоке или на плотных питательных средах. 
Чистые культуры микроорганизмов обычно выращивают 
в пробирках на скошенном агаре или в бульонной среде. Если для 
выращивания в пробирках требуется плотная среда, то при подготов-
ке к стерилизации расплавленную среду наливают на ⅓–¼ объема 
пробирки. После стерилизации пробирки с незастывшей средой рас-
кладывают в наклонном положении. Пробирки с застывшей средой 
называют 
косяками
. 
Для выращивания аэробных бактерий в жидкой среде пробир-
ку заполняют питательным бульоном на ⅓, а для анаэробных бакте-
рий – на ⅔. Характерными признаками роста микроорганизмов в бу-
льоне являются равномерное помутнение, образование пленки на по-
верхности, наличие осадка определенного типа и др.
Пробирки, заполненные на ½ объема застывшей плотной средой, 
называют 
столбиками
. Их используют для посева культуры 
уколом.
Для выращивания микроорганизмов в колбах используют 
только жидкие питательные среды, а в чашках Петри – плотные. 
В чашках Петри, как правило, культивируют аэробные и фа-
культативно-анаэробные микроорганизмы. Они образуют на поверх-
ности плотной питательной среды колонии определенного типа. 
Для культивирования анаэробных бактерий используют специ-
альные приборы – анаэростаты (рис. 4.1).

---

32
Рис. 4.1. Анаэростат 
Анаэростат представляет собой цилиндр, который через ваку-
умную резиновую прокладку закрывают крышкой. На крышке анаэ-
ростата расположены вакуумметр и два крана: один присоединяется 
к насосу, откачивающему воздух, другой – к баллонам с газами
(N
2
, CO
2
, H
2
). После размещения чашек или пробирок из анаэростата 
удаляют воздух при помощи вакуумного насоса, затем кран перекры-
вают специальным винтом, анаэростат разъединяют с вакуумным 
насосом и переносят его в термостат.