O‘zbekiston respublikasi oliy va o‘rta maxsus ta’lim vazirligi urganch davlat universiteti “Biologiya” kafedrasi

Nazorat choralari:immunitetli navlardan foydalanish; ekish va hosilni yig'ish muddatlarini tartibga solish [masalan, janubiy hududlarda erta ekish va erta (iyulda) hosilni yig'ish paytida kartoshkaning erta navlari viruslardan eng kam ta'sirlanadi]; urug'lik uchastkalarini kasal o'simliklardan tozalash; vektorlar va begona o'tlarni nazorat qilish, tomurcuklanma materialini isitish, boshqa maxsus tadbirlar.
Nazorat savollari:

1. 
   RGA va RTGA qanday kasalliklar uchun keng qo'llaniladi?
   
2. 
   Reaksiyada qaysi eritrotsitlar ishlatiladi?
   
3. 
   RNKning ikkilamchi tuzilishini nima barqarorlashtiradi?
   
4. 
   Bakteritsid ta'siri qaysi konsentratsiyada seziladi?
   
5. 
   Virusli kasalliklarga qarshi kurash choralari?
   

15-ma’ruza
Mavzu: "Viruslarni immunologik usullar yordamida diagnostika qilish"

Reja:

1. Ikki tomonlama radial immunodiffuziya.

2.Yog'ingarchilikning asosiy turlari.
3. Immunautorradiografiya usuli.
Kalit so'zlar: usul, agar, diffuziya, antikor, antigen, zardob, antitoksin, avtoradiografiya.
Usulning printsipi.Agar yoki agaroz jelida kesilgan quduqlarga antigen va antiserum joylashtiriladi, ular bir-biriga qarab tarqaladi. Ularning nisbatlari ekvivalent bo'lgan jelning ushbu qismida ko'rinadigan cho'kma hosil bo'ladi. Ikki marta radial immunodiffuziya shisha slaydlarda (mikrometod) amalga oshiriladi.
Metodologiya.1,5 g agar 100 ml buferda (0,15 M NaCl) suv hammomida eritiladi. Taxminan 1,5 mm qalinlikdagi agarning bir xil qatlamini olish uchun 3 ml lik qismlarda issiq agar jeli juda gorizontal slaydlarga surtiladi. Agar qotib qolgandan so'ng, plitalar foydalanishga tayyor. Agarda immunokimyoviy tadqiqotlar o'tkazish xususiyatiga qarab, quduqlar tayyor shtammlar yordamida yoki shisha (yoki metall) naychadan kesiladi. Quduqlar bir-biridan 4 dan 10 mm gacha bo'lishi kerak. Ba'zi quduqlarga zardob qo'shiladi, boshqalarga antijenler qo'shiladi. Eritmalarni tayyorlagandan so'ng, immunodiffuziya nam kamerada 4 haroratda amalga oshiriladi, yigirmayoki 37C. Diffuziyaning davomiyligi tadqiqot maqsadlariga bog'liq, u kamida 24 soat bo'lishi kerak va ba'zi hollarda 6-7 kungacha bo'lishi mumkin. Immunodiffuziya oxirida natijalar to'g'ridan-to'g'ri nam slaydda baholanishi mumkin. Natijalarni baholashning yana bir usuli bor. Buning uchun birinchi navbatda plitani 2-3 marta 0,15 M NaCl eritmasida 12 soat davomida namlash orqali cho'ktirmaydigan moddalarni yuvish kerak. Keyin gel yuzasiga distillangan suv bilan namlangan filtr qog'oz qo'yiladi va gel 40-50 ° C da quritiladi.C yoki xona haroratida. Quritilgan jel plitalari odatda amido qora 10B bilan bo'yaladi va keyin immunodiffuziya natijalari baholanadi.