|
Uchinchidan, dastlabki ishlarning aksariyati TMVda virusning yuqumli boshlanishi aniq RNK ekanligi aniq bo'lishidan oldin ham amalga oshirilgan. Erkin TMV RNK buzilmagan virus RNKsining atigi 0,1% infektsiyasiga ega, garchi u rekonstruksiya tajribalarida ko'rsatilganidek, potentsial ravishda deyarli virus kabi yuqumli. Shunday qilib, virusli oqsilni TMV dan ajratadigan har qanday agent virusning sezilarli inaktivatsiyasiga olib keladi. Bundan tashqari, shuni ta'kidlash kerakki, dastlabki tadqiqotlarda kapsid oqsilining parchalanishi, ehtimol, ifloslantiruvchi nukleazlar ta'sirida RNKning inaktivatsiyasiga olib keldi. Viruslarning xlor preparatlari ta'siriga chidamliligi haqidagi adabiyot ma'lumotlari tahlil qilinadi. Ma'lum bo'lishicha, Teylor virusi Coxsackie A2 virusiga qaraganda ancha chidamli. Ikkinchisi poliomielitning 1-toifa viruslariga nisbatan ancha chidamli.Bu haqda ham yuqorida qayd etilgan edi viruslarning zaiflashgan shtammlari virulentlarga qaraganda ancha chidamli. Ichimlik suvi ikki marta xlorlangan bo'lsa, viruslar butunlay inaktivlanadi. Bunday holda, tozalashdan oldin reaktivning dozasi 1 mg / l konsentratsiyada qoldiq xlorni ta'minlashi kerak. Suvning xlor bilan aloqa qilish vaqti kamida 30 minut. Tozalashdan keyin suv qayta xlorlanadi. Agar virus zarrasi organik yoki noorganik aralashmalar bilan o'ralgan bo'lsa, viruslarni muvaffaqiyatli inaktivatsiya qilish umidlari amalga oshmasligi mumkin. Ma'lumki, iflosliklar virusli zarrachalar yuzasida himoya qobig'ini hosil qilib, uni xlor ta'siridan himoya qiladi. Biz allaqachon ko'rinadigan yorug'lik ta'siri masalasi bilan bog'liq holda turli bo'yoqlar va akridin hosilalarining viruslarni in vitro inaktivatsiyasiga ta'sirini ko'rib chiqdik. Ushbu turdagi ba'zi birikmalar virusli infektsiyaning zaiflashishiga olib keladi va virusning in vivo ko'payishini sekinlashtiradi. Ushbu bobda virusni inaktivlashtiruvchi vositalarning har xil turlari bir necha toifalarga bo'lingan. Ba'zi hollarda, bu bo'linma juda sun'iydir, chunki u virusni inaktivatsiya qilish jarayonida turli agentlarning yaqin o'zaro ta'sirini aks ettirmaydi. Masalan, in vitro viruslarga turli omillarning ta'sirini o'rganishda haroratning ta'siri eritmaning pH qiymatiga bog'liq va 5-ftorouratsilning in vivo jonli virus RNKiga qo'shilishi uning ultrabinafsha nurlanishida inaktivatsiyaga sezgirligini oshiradi. Ko'rinib turibdiki, suvdagi virus kontsentratsiyasining har bir keyingi o'n baravar oshishi uning inaktivatsiyasi dinamikasiga ta'sir qildi va virusning dastlabki tarkibini suvdan mumkin bo'lgan izolyatsiyasining minimal darajasiga kamaytirish uchun zarur bo'lgan ultrabinafsha nurlarining dozasini ikki baravar oshirdi. Suv namunalarida ta'sir qilishning turli davrlarida virusning inaktivatsiyasi foizini tahlil qilish, Xlorning halokatli ta'siri uning oksidlanish qobiliyatiga bog'liq. Shunday qilib, 37 ° C va pH 7,0 haroratda virusni inaktivatsiya qilish tezligi redoks potentsialining qiymatiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir. Binobarin, xlorning halokatli ta'siri ko'p sharoitlarga bog'liq. Tozalangan suvning harorati va uning pH darajasi, aralashmalarning tarkibi, erkin xlorning konsentratsiyasi va suvning xlorning singishi ta'sir qiladi. Inaktivatsiya virus shtammlarining chidamliligiga, ularning kontsentratsiyasiga, viruslarni aralashmalardan tozalash darajasiga va boshqa sharoitlarga bog'liq bo'lishi mumkin. Takaxashi va Kristensen birinchi bo'lib TMV ning eritmadagi sonikatsiyasi virusning inaktivatsiyasiga olib kelishini ko'rsatdi. Inaktivatsiyalangan virus miqdori ishlov berish vaqtining oshishi bilan ortadi. TMV ning suyuq kristall preparatlari qayta ishlashdan so'ng darhol ikki sindirish qobiliyatini yo'qotadi. Davolashning davomiyligi oshishi bilan oqimdagi anizotropiya kamayadi va mayda zarrachalar soni ortadi. Oster tomonidan ko'rsatilgandek, uzunligi taxminan 280 nm bo'lgan novda shaklidagi zarrachalar soni qayta ishlash jarayonida kamaydi. Shu bilan birga, uzunligi bu qiymatning yarmiga teng bo'lgan zarrachalar soni birinchi navbatda ortib, keyin kamayib ketdi, buning natijasida preparat juda ko'p qisqa zarrachalarni o'z ichiga oladi. 280 nm zarrachalar sonining kamayishi infektsiyani yo'qotish bilan chambarchas bog'liq edi. O'shandan beri turli mualliflar TMV uchun shunga o'xshash natijalarga erishdilar va aslida ultratovush ta'sirida inaktivatsiya virus tayoqchalarini kichikroq va kichikroq bo'laklarga yo'q qilish bilan bog'liqligi isbotlangan deb hisoblash mumkin. Tuproq sharoitlari o'simlik qoldiqlarida TMV ning saqlanishiga ta'sir qiluvchi muhim rol o'ynashi mumkin. Virusning inaktivatsiyasi nam, yaxshi gazlangan tuproqlarda quruq, zich yoki botqoq tuproqlarga qaraganda tezroq sodir bo'ladi. Past haroratlarda shira odatdagidan ko'proq vaqt davomida yuqumli bo'lib qoladi (sholg'om mozaikasi virusi bo'lsa, 6 kungacha). Ehtimol, bunday sharoitlarda infektsiyaning yo'qolishi, asosan, vaqt o'tishi bilan virusning oddiy inaktivatsiyasi bilan bog'liq. Xempton va Fulton oksidlangan fenollarning xom ekstraktlarda turli viruslarning yuqish qobiliyatini yo'qotishida muhim rol o'ynashini ko'rsatdi. Virus inaktivatsiyasida polifenoldan olingan chiionlarning roli Mink tomonidan tasvirlangan. Xlorogen kislotaning o'zi tozalangan olma mozaikasi virusini biroz inaktivatsiyaga olib keladi. Tirozinaza aralashmasiga qo'shilganda (fermept, xlorogen kislotani xinonga aylantirish) virusning inaktivatsiyasi ancha samarali bo'ladi va hosil bo'lgan xinon miqdoriga mutanosib ravishda sodir bo'ladi. Xlorhepik kislotadan xinonni ajratish mumkin emas, ammo kimyoviy jihatdan olingan o-benzokinon kabi barqarorroq xinonlar olma mozaikasi virusini tez va to'liq inaktivatsiyaga olib keladi. Keyin turli xinonlarning virus inaktivatsiyasiga ta'sirini solishtirish uchun miqdoriy usullar ishlab chiqildi. Infektsiyalangan o'simlikka odatdagidan yuqori harorat ta'sirida o'simlik o'limiga olib kelmasdan virusning qisman yoki to'liq inaktivatsiyasiga olib kelishi mumkin. Infektsiyalangan o'simliklarni yoki o'simlik qismlarini suvda yoki havoda isitish (ba'zan izolyatsiya qilingan kurtaklar uchlari madaniyati bilan birgalikda) hozirgacha ma'lum bo'lgan yagona usuldir. bu o'simlik materialini virusli infektsiyadan butunlay ozod qilish imkonini beradi. Bundan tashqari, 10 daqiqalik aloqada 0,2 mg / l qoldiq xlorning odatdagi dozasi, agar ularning miqdori 1 ml ga 30-3000 virusli birlik bo'lsa, ba'zi ichak viruslarini yo'q qilish uchun etarli emasligi aniqlandi. Virusli suvni zararsizlantirish uchun xlorlashning samaradorligini eksperimental tadqiqotlar olib borildi. Ma'lum bo'lishicha, poliomielit viruslarini inaktivatsiya qilish uchun 30 daqiqalik aloqa vaqtida 2,1, 0,9 va 0,5 mg/l qoldiq xlor dozalari etarli. Shu bilan birga, 15 daqiqalik ta'sir qilish bu patogenlarni yo'q qilish uchun etarli emas. Ko'p yillar davomida tamaki kabi bir yillik ekinlar etishtirilgan hududlarda virusning xarakterli shtammlari ham ustunlik qilishi mumkin. Shunday qilib, Jonson va Vallo ko'rsatdi uzoq muddatli tamaki yetishtiriladigan hududlarda turli fermalarda TMV ning turli shtammlari ustunlik qiladi. Kattaroq miqyosda geografik izolyatsiya, ayniqsa, turli iqlim sharoitida, shtammlarning farqlanishiga olib kelishi mumkin. Misol uchun, yozgi harorat yuqori bo'lgan mamlakatlarda tabiiy sharoitda viruslarning in vivo inaktivatsiyasi sodir bo'lishi mumkin. Misol uchun, Hindistonning ba'zi qismlarida an'anaviy omborlarda saqlanadigan kartoshka ildizlari barg o'simtasi virusidan tozalanishi mumkin, sovuq do'konlarda saqlanadigan ildizlar esa to'liq yuqumli bo'lib qoladi. Xuddi shunday, Imperial vodiysida (Kaliforniya) o'stirilgan qulupnay o'simliklari qulupnay ajinlari virusidan ozod qilindi. In vivo viruslarni issiqlik inaktivatsiyasining mumkin bo'lgan mexanizmlari bobda muhokama qilinadi. Ikki xil turdagi o'simlik materiallarini issiqlik bilan ishlov berish mumkin. O'simliklarning harakatsiz qismlari (ildiz, daraxt kurtaklari, shakarqamish so'qmoqlari) odatda o'sayotgan to'qimalarga qaraganda yuqori haroratga bardosh beradi; bu holatda davolanishning ta'siri, ehtimol, virusning bevosita inaktivatsiyasiga bog'liq. Harorat sharoitlari va davolanish muddati juda katta farq qiladi (35 dan 54 ° C gacha, bir necha daqiqadan bir necha soatgacha). Ko'pincha issiq suv isitish uchun ishlatiladi, chunki issiq havo bilan qisqa muddatli davolanish paytida o'simlik materiallari, qoida tariqasida, bir tekis isitilmaydi. Agar to'qimalar to'liq namlanmagan bo'lsa, unda quruq issiqlik bilan ishlov berish issiq suv bilan ishlov berishdan sezilarli darajada kam samarali bo'ladi. Urug'larni tahlil qilish uchun, odatda suvda yoki bufer eritmasida ularning namunasining gomogenatidan foydalaning. Uni gomogenizatorda yoki oddiy chinni ohak bilan olish mumkin. Serologik diagnostika uchun gomogenat filtrlanadi yoki sentrifugalanadi. Ko'rsatkich diagnostikasi uchun u urug'lar tarkibidagi inhibitorlar tomonidan virusni inaktivatsiyasini oldini olish uchun natriy dietilditiokarbamat (DIECA) kabi virus stabilizatorlari qo'shilishi bilan tayyorlanadi. Bakteritsid qoldiq xlorning tavsiya etilgan minimal konsentratsiyasi jadvalda keltirilgan. 7.1. Ushbu ma'lumotlar 20 ° dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratlarda o'tkazilgan tajribalarga asoslangan. erkin xlor bilan 10 daqiqa aloqa qilgandan keyin va estrodiol xlor bilan 60 daqiqa aloqa qilgandan keyin. Kistlarni yo'q qilish va viruslarni faolsizlantirish uchun zarur bo'lgan qoldiq xlorning minimal darajasi ancha yuqori; Faqat dissotsiatsiyalanmagan gipoxlorid kislota samarali antiviral vosita hisoblanadi. Shu sababli, qoldiq xlorning kontsentratsiyasi odatda maqbul deb hisoblansa-da, ifloslangan daryolar va ko'llardan olingan suv odatda yuqori dozalarda xlor bilan ishlov beriladi. Masalan, oldindan xlorlash (burilish nuqtasiga qadar) tozalash jarayonining barcha bosqichlarida tozalangan suvda erkin qoldiq xlorni hosil qilish va ushlab turish uchun ishlatilishi mumkin. Biroq, ko'pincha o'sib borayotgan to'qimalar issiqlik bilan ishlov berishga duchor bo'ladi. Bunday holda, qoida tariqasida, issiq suv emas, balki issiq havo bilan ishlov berish qo'llaniladi. Issiqlik odatda 35-40 ° S haroratda bir necha hafta davomida amalga oshiriladi. Ushbu davolash o'simlik materialining eng yuqori omon qolishini ta'minlaydi. Issiqlik bilan ishlov berish shartlari juda katta farq qiladi va har bir virus-o'simlik birikmasi uchun empirik tarzda tanlanadi. Ozon issiqlik chiqishi bilan parchalanadi. Kislorod hosil bo'lishi bilan 2 mol ozonning parchalanishi 297,4 kJ chiqaradi. Ozonning bakteritsid ta'siri oksidlanish reaktsiyalarining paydo bo'lishi (ozonoliz) bilan bog'liq. Ozonning suvda parchalanishida hosil bo'ladigan erkin radikallar ham reaksiyaga kirishadi. Ozon kuchli oksidlovchi vosita bo'lib, aromatik yadrolarni yo'q qiladi, lekin piridin halqalariga ta'sir qilmaydi. Sporalarning to'liq nobud bo'lishi faqat 10 mg/l va undan yuqori ozon dozasida kuzatiladi. Escherichia coli 2 mg/l ozon dozasida deyarli butunlay nobud bo'ladi. Ozonning 0,3 mg/l qoldiq dozasida 4 minutdan keyin viruslarning 99,99% inaktivatsiyasi kuzatiladi. Bakteritsid ta'siri 0,1 mg / l dan yuqori suvda ozon konsentratsiyasida sezilarli darajada namoyon bo'ladi. Ozonning suv bilan aloqa qilish vaqti, dezinfeksiya uchun 3-10 minut talab qilinadi. Dezinfektsiyalash uchun zarur bo'lgan ozon dozasi 1-4 mg / L ni tashkil qiladi. U suvning sinov ozonlanishi bilan tanlanadi, dezinfeksiya nazorati qoldiq ozon bilan amalga oshiriladi. 0,05-0,1 mg O3/l ga teng qoldiq ozon konsentratsiyasi tozalangan suvni ozonlashda bakteritsid ta'sirini ta'minlaydi. Stabillashgan yoki epidemiologik xavflilik xususiyatlari ichak guruhining boshqa patogen bakteriyalariga nisbatan tashqi salbiy omillarga eng chidamli mikroorganizmlar hisoblangan ichak tayoqchasi tarkibiga sinovdan o'tkazildi. Stabilizatsiya uchun yuborilgan faol loy ichak guruhining juda ko'p miqdordagi bakteriyalarini o'z ichiga oladi (1 ml da yuz minglab). Stabilizatsiya jarayonida bu bakteriyalar 90-99% ga nobud bo'ladi. Shu bilan birga, bakteriyalarning saprofit guruhi sonining (umumiy soniga ko'ra) o'rtacha 80% ga kamayishi kuzatiladi. Stabilizatsiya davrining oxirida asosan sporlar qoladi, ular uzoq muddatli shamollatishdan sezilarli darajada ta'sir qilmaydi. Stabilizatsiya jarayonida virus inaktivatsiyasi ham kuzatiladi.Koʻtarilgan haroratda metall ionlarining qoʻshilishi RNK tuzilishida ikki xil oʻzgarishlarga olib kelishi mumkin. Metall ionlari RNKning ikkilamchi tuzilishini barqarorlashtiradi, bu qizdirilgan eritmalar tomonidan ultrabinafsha nurlarning yutilishining pasayishidan dalolat beradi. Biroq, bu barqarorlashuvga qaramay, qizdirilganda infektsiya yo'qoladi va fosfodiester aloqalari gidrolizlanadi. 10,3 M konsentratsiyada va pH 8 da kaltsiy va magniy ionlari (eksperimental tizimlarda keng tarqalgan vosita tarkibiy qismlari bo'lgan) alohida qiziqish uyg'otadi. 5 65 RS da infektsiyani tez yo'qotishiga olib keladi. Bu juda ehtimolga o'xshaydi. virus zarrasi bilan bog'liq bo'lgan metall ionlari viruslarning termal inaktivatsiyasida rol o'ynashi.
Do'stlaringiz bilan baham: |
