Muhandislik qilingan oqsil-oqsil kompleksining strukturasini aniqlash va termodinamik stabilizatsiyasi

Protein muhandisligi
DNK texnologiyasidagi yutuqlar saytga yo'naltirilgan mutagenezni to'g'ridan-to'g'ri o'zgartirdi
yuqori konsentratsiyali insulin dimer va heksamer shaklida monomerik bo'lsa, degan fikrga olib keldi
ko'pincha yaxshi natijalar beradigan sirt qoldiqlarining mutatsiyalari (van den Burg
Saytga yo'naltirilgan mutagenez vositasi, kerakli DNK ketma-ketligini o'z ichiga olgan oligonukleotidlar
jarayonni tezlashtirish uchun (Brange va Volund 1999; Vajo va Dakvort 2000). Kuzatish
2002) yoki disulfid ko'priklar (Matsumura va boshq. 1989).
oqsilning yaxshilanishi - bu insulin. Insulinning qon oqimiga kirish tezligi
ikkilamchi tuzilish elementlari. Kari Mullis tomonidan PCR texnikasining ixtirosi (Mullis va
oqsillar (van den Burg va Eijsink 2002). Biroq, oqsil yadrosi ko'pincha allaqachon yaxshi to'plangan
hozirda klinik qo'llaniladigan tezroq ta'sir qiluvchi insulin (Brange va Volund 1999; Vajo va Dakvort
24
fraktsiyasini oshirish mumkin, bu tezroq so'rilishiga olib keladi. O'z-o'zidan ishtirok etadigan sirtlar
misol (Kunkel 1985; Kunkel va boshq. 1987). a-da kengroq o'zgarishlarni olish strategiyasi
bp) sintetik yoki hazm qilingan DNK genning tegishli segmentini almashtirish uchun ishlatiladi. Bu
faol sayt muvaffaqiyatli natijani sezilarli darajada osonlashtirishi mumkin. Ilgari, ichidagi qoldiqlar
oldinga texnikasi, ammo oqibatlarini oldindan aytish ancha qiyinroq
(Marshall va boshq. 2002) barqarorlikning oshishiga olib keldi. Bir qator oqsillar ham tomonidan barqarorlashtirilgan
insulinni teri ostiga yuborishdan keyin so'rilishning kechikishi va kuzatilishi
odatda mutatsiyani o'z ichiga olgan PCR mahsulotlarini kuchaytirish uchun primer sifatida ishlatiladi.
va Eijsink 2002). Masalan, sirt orasidagi elektrostatik o'zaro ta'sirlarning yaxshilanishi mavjud
Faloona 1987) rekombinant DNK texnologiyasi uchun yangi davrning boshlanishi edi. sifatida foydalanilganda
va oqsil tuzilishi va barqarorligi haqidagi bilimlar ortib borishi bilan, diqqat markaziga o'zgardi
in'ektsiyadan keyin ba'zi hollarda etarlicha tez emas va shuning uchun zarur deb hisoblangan
Muhim klinik misol, bu erda saytga yo'naltirilgan mutagenez muvaffaqiyatli olib keldi
protsedura kattaroq bo'laklarni, masalan, butun kodlash segmentlarini almashish uchun javob beradi
ning termodinamik barqarorligini yaxshilashga urinishlarda ko'pincha hidrofobik yadro tanlangan
2000).
kodlovchi genning alohida mintaqasi kassetali mutagenezdir, bu erda kaset (odatda 20-100)
o'zgarishlar oqsilda bo'ladi. Protein tuzilishi, bog'lanish joyi yoki haqida ma'lumot
prolinlarning kiritilishi kabi ochilgan holatning entropiyasini kamaytirish (Muslin va boshqalar.
assotsiatsiya aniqlangan va mutatsiyaga uchragan (Brange va boshq. 1988; Brange 1997), natijada
qoldiqlari (Grimsley va boshq. 1999; Spector va boshq. 2000) va spiral dipol N-qopqoq va C-qopqoq qoldiqlari
Machine Translated by Google

---