Muhandislik qilingan oqsil-oqsil kompleksining strukturasini aniqlash va termodinamik stabilizatsiyasi

Protein muhandisligi
1998 yil; Krameri va boshqalar. 1998 yil; Zaccolo va Gherardi 1999) va tasodifiy kiritish/o'chirish
antikorlar (Cwirla va boshq. 1990; Scott and Smith 1990) va streptavidinga (Devlin va boshq. 1990) mumkin .
Tanlash jarayoni ma'lum bir maqsadli oqsil yoki molekula bilan bog'langan yaqinlikka asoslanadi
butun gen bo'ylab tasodifiy. Buning uchun eng keng tarqalgan usullar qo'llaniladi
kombinatorli oqsil kutubxonalarini ko'rsatish. Qisqasi, bir vaqtning o'zida uch xil guruh
Kutubxona a'zolarini ko'rsatish va tanlashning eng ko'p qo'llaniladigan usuli bu fajni ko'rsatishdir.
Jorj Smits guruhi tomonidan namoyish etilgan (Smith 1985; Parmley and Smith 1988). Haqiqat shundaki,
Muayyan pozitsiyalarga randomizatsiyani hal qilish texnologiyasi (har bir pozitsiyada bir nechta yoki ko'p
genotip o'rtasidagi jismoniy bog'lanish metodologiyasini taqdim etish orqali tanlash uchun ishlatiladi
Faglarni ko'rsatishda tasodifiy genlarning har biri kodlovchi fag genlaridan biriga kiritiladi.
25
tanlanadi. Xuddi shu yili McCafferty et. al o'zgaruvchan domenining kutubxonalarini ko'rsatadi
1980-yillarning oxirida turli xil kombinatsiyalarda bir nechta mutatsiyalarni kiritish usullari mavjud edi
mos keladigan oqsilni kodlaydigan mutant genlar hovuzini yaratish uchun bir necha pozitsiyalarda o'zgargan
skrining va tanlash texnologiyalari muhim ahamiyatga ega bo'ldi. Fajlarni ko'rsatish kabi usullar (Smit 1985),
mutagenez (Murakami va boshq. 2002).
ishlatiladigan tanlash usuli, turlar orasidagi keyingi mutagenez ko'proq yoki kamroq oson
ligandlardan monoklonalgacha bo'lgan randomizatsiyalangan peptidlar kutubxonalarini ko'rsatishda foydalanishni tasvirlab berdi.
degeneratsiyalangan oligonükleotidlar, xatoga moyil PCR va/yoki DNKni aralashtirish (Stemmer 1994; Arnold
matritsaga misol. Maqsadli oqsil bilan bog'langan kutubxona a'zolari ajratiladi
20 tagacha aminokislota (kombinator mutagenez) uchun kodon aralashmalaridan foydalanish yoki ularni tarqatish
protsedura davomida nuklein kislotani kodlovchi) va fenotip (oqsil). Aksariyat hollarda,
fag zarrachasi ichida ko'rsatilgan oqsilni kodlaydigan DNKni o'z ichiga olgan
Filamentli fag yuzasida peptidni ko'rsatish va tanlash qobiliyati birinchi bo'ldi
yuqori xilma-xillik kutubxonasi. Strategiya loyihaning maqsadiga bog'liq va o'z ichiga olishi mumkin
ribosoma displey (Hanes va Plückthun 1997) va mRNK displey (Roberts va Szostak 1997)
qobiq oqsili. Odatda protein pIII fagning uchlarida bir nechta nusxada joylashgan
keng tarqalgan (Merino va boshq. 1992). Bunday yondashuvlarda gen bir vaqtning o'zida
Kutubxonada kerakli xususiyatlarga ega a'zoni topish imkoniyatiga ega bo'lish, kuchli rivojlanishi
tanishtirish.
antikorlar, bir zanjirli Fv (McCafferty va boshq. 1990).
kutubxonaning qolgan qismi. Tanlov jarayoni bir necha turda takrorlanishi mumkin. Bog'liq holda
Machine Translated by Google

---