|
Отбор устойчивых к вилту генотипов
Реакционная смесь для окрашивания фермента полифенолоксидазы:
Na2HPO4 – 51,5 мл, Лимонная кислота – 48,5 мл
Гель инкубируют в течение 30 мин.
Определение маркера на скороспелость
Реакционная смесь для окрашивания фермента каталазы (Cardy e.a., 1980)
Вода - 50мл, Феррицианид калия- 500мг
Хлорное железо -500мг
Поверхность гелевого блока заливается 0,01%-ной Н2О2 на 7-10 мин. Смывается
дистиллированной водой и заливается красящим раствором. Через 5 мин. сливается и смывается водой.
Каталазная активность выявляется в виде белых полос на темном фоне. Фотографирование проводится
немедленно после окрашивания.
Реакционная смесь для окрашивания фермента Глутаматдегидрогеназы (Shaw, Prasad, 1970)
0,5 М фосфатный буфер, pH 7,0 - 25 мл
1М глутамат натрия - 5 мл
Вода - 70 мл
НАД - 60 мг
НСТ - 30 мг
ФМС - 2 мг
Гелевый блок инкубируют в этом растворе в темноте при 30ºС.
В результате изучения семей и линий хлопчатника в селекционном питомнике 1 года, полученных
на основе простых парных внутривидовых насыщающих и сложных межгибридовых скрещиваний, на
однородность морфобиологических признаков (скороспелость, вилтоустойчивость и другие признаки) по
биохимическим маркерным показателям выявлено, что скороспелость изученных семей характеризуется
от 50% всходов до 50% созревания первой коробочки от 98 до 118 дней.
Самый короткий вегетационный период имеют семьи 1090, 922, 1132, 1144, 1317, 1552/1230,
1613/1293, 1730, 1730/1379, 1730/1404, 1872, 1950 (98-104 дня). Относительно позднеспелыми являются
семьи 631, 1367, Л-202, Л-202/1803, Л-459 и Л-508, у которых вегетационный период составляет 111-118
дней. У остальных семей он варьирует от 105-до 110 дней (таблица 1).
286
Количество поражаемых растений вилтом в изученных семьях варьирует от 7,5% до 18,6% в
общей и сильной степени, тогда как районированный сорт С-6524 поражается вилтом на 74,8 в общей и в
сильной степени на 54,0%. Это указывает на то, что у этих семей имеются гены
вилтоустойчивости родительских форм, которые имеют различную генетическую устойчивость к
естественным агрессивным популяциям гриба вертицилиум.
Анализ выявил, что не все семьи имеют маркеры однородности по морфобиологическим
признакам. Так, например, семьи 388, 631, 1344, 1532, 1541, 1613/1293, 1730, 1950/1569, Л-106, Л-202, Л-
202/1803, Л-225/1893, Л-225/1924, Л-459, Л-1508 и Л-949, у которых отсутствуют маркеры по
выровнености этих семей, т.е. эти семьи и линии обладают некоторой гетрозиготностью по
морфохозяйственным признакам (таблица 1).
Следовательно, эти семьи и линии требуют дальнейшей селекционной доработки по
однородности морфохозяйственных признаков, хотя морфологически они кажутся однородными.
Полученные результаты показывают, что изученные семьи и линии в селекционном питомнике 1 года
имеют маркерные гены по скороспелости, вилтоустойчтвости и по однородности морфобиологических
признаков за исключением семей и линий 388 и 631 по скороспелости; 388, 631, 1344, 1532, 1541,
1613/1293, 1730, 1956/1569, Л-606, Л-202, Л-202/1803, Л-225/1893, Л-225/1924, Л-459, Л-1508 и Л-949 по
выровнености морфохозяйственных признаков.
Количество семей, не имеющих маркеры по однородности, составляют 56,7%, а по скороспелости
6,7%, тогда как по вилтоустойчивости все семьи имеют маркеры вилтоустойчивости. Очень высокая
выравненность семей по скороспелости и вилтоустойчивости указывает на то, что при подборе
родительских форм для скрещивания привлекались лишь самые скороспелые и высоковилтоустойчивые
сорта и линии, имеющие различные морфохозяйственные признаки (по высоте растения, габитусу куста,
выходу и качеству волокна, крупности коробочки и другие признаки). Поэтому по морфохозяйственным
признакам получена высокая гетрогенность. Это говорит о том, что основные хозяйственные признаки
имеют более сложный генетический контроль, чем скороспелость и вилтоустойчивость.
Результаты изучения взаимосвязей морфохозяйственных признаков и их маркеров в
селекционном питомнике 2 года, показывают, что все изучаемые линии, полученные от внутривидовых,
межлинейных, межсортовых и беккроссов обладают маркерами по скороспелости и вилтоустойчивости,
тогда как по однородности не все линии имеют маркер выровнености.
Так, например линии Л-559/346, Л-83/22, Л-252/428, Л-932, Л-1226, Л-822, Л-308/1458,
Л-82/424, Л-575/1716, Л-456/82, Л-932/1831, Л-932/1858, Л-932/1872 не имеют маркер однородности, хотя
по высоте растения, скороспелости, вилтоустойчивости, крупности коробочки, выходу и длине волокна
они показывают относительно высокую выравненность. Это, по-видимому, связано с элиминацией
некоторых признаков, которые находятся в скрытом дискретном состоянии и не дают фенотипического
проявления.
Необходимо отметить, что в процессе селекционной работы нам удалось создать генотипические
однородные, скороспелые и вилтоустойчивые линии, которые подтверждаются генетическими маркерами.
При этом следует отметить, что коэффициент выровнености селекционного материала по сравнению с
селекционным питомником 1 года гораздо выше. Количество неоднородных линий в селекционном
питомнике 2 года составляет 34,2%, тогда как в селекционном питомнике 1 года 56,7%. Это говорит, о
том, что на базе фенотипической оценки селекционного материала наблюдается некоторая эффективность
селекционного процесса по сравнению с селекционным питомником 1 года, но все равно селекционер при
фенотипической оценки выровнености семей и линий по морфобиологическим признакам допускает
погрешности, что ведет к увеличению селекционной работы и размножению неоднородных линий.
Таблица
1
Do'stlaringiz bilan baham: |
