Microsoft Word Conf-селекция rtf

Методика опыта.
Отбор адаптивных генотипов вели по технологии, разработанной в 
лаборатории прикладной биохимии растений института Генетики и экспериментальной биологии 
(Шадманов Р.К.). Данная технология позволяет вести отбор генотипов на уровне семенного материала по 
заранее смаркированным признакам. Выбор подобного объекта и подходы к нему обусловлены тем, что 
семена являются фиксированной стадией развития растений и обладают всеми признаками будущего 
организма. Кроме того, качественная характеристика белков и ферментов в семенах не зависит от 
факторов окружения. Маркерами служили отдельные белки и ферментные системы прямо или 
опосредованно связанные с проявлением признака, усиленного в процессе адаптации к засолению, 
болезням и недостатку водоснабжения. Для анализа использовалось микроколичество зародышей семян 
(генотипов) с микропилярной области, которые подвергались биохимическому анализу для выявления в 
них маркерных ферментов. Для индивидуальной оценки каждого генотипа по нескольким признакам 
можно использовать аппараты для трубчатого электрофореза в ПААГ, либо вырезать полосы геля после 
разделения в пластинчатом электрофорезе в ПААГ. После электрофореза гели проявляются либо на белки 
амидовым черным или кумасси голубым, либо на ферменты путем инкубации в соответствующей системе 
с субстратом. Полученные данные можно оценивать визуально. В качестве биохимических методов 
использовались методы электрофоретического анализа белков и ферментов в ПААГ. 
Определение множественных форм ферментов методом электрофореза: 
Отбор устойчивых к вилту биотипов вели с помощью электрофоретического разделения 
ферментов.
Зародышевая ткань, взятая на анализ, измельчается на холоде с небольшим объемом (1мл) 
фосфатного или трис-HCl буфера pH 8,6, затем инкубируется в течение 30 минут в холодильнике и 
центрифугируется на холоде при 15 000 об/мин. Супернатант используется для электрофоретического 
разделения белков (ферментов) в системе 7% акриламидного геля в приборах для электрофореза. Для 
индивидуальной оценки каждого генотипа по исследуемым признакам использовались аппараты для 
трубчатого электрофореза, либо пластинчатого. Длительность проведения электрофореза составила 1,5-2 
часа при силе тока 4 мА. Растворы для электрофореза готовились на дистиллированной воде, 
фильтровались и хранились в холодильнике.