К 70-летию академика юнусова марата сабировича



Download 5,84 Mb.
Pdf ko'rish
bet211/318
Sana25.02.2022
Hajmi5,84 Mb.
#275819
1   ...   207   208   209   210   211   212   213   214   ...   318
Bog'liq
Chim med

ФУЛЛЕРЕН С
60
 В ОСНОВЕ ЛИГАНДА СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЫ
ДЛЯ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ МЕМБРАННЫХ
ПОРФИРИНСВЯЗЫВАЮЩИХ БЕЛКОВ 
 
М.А. Орлова, А.П. Орлов, Д.А. Кузнецов
 
Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический ф-т; 
119899, Москва, Ленинские горы, д.1, стр.3 
orlova.radiochem@mail.ru 
Во внешней мембране митохондрий млекопитающих недавно была найдена минорная 
группа белков, обладающих заметной способностью к селективному связыванию порфирина 
К и его производных, но не связанных напрямую in situ ни с гемом, ни с любым другим пор-
фирином. Функциональная роль и структурные особенности этих мембранных белков неяс-
ны и требуют надежного метода выделения и очистки. 
Для решения проблемы предложена методика аффинной хроматографии, основанная на 
применении новой неподвижной фазы, содержащей в качестве лиганда порфириновый до-
мен, иммобилизованный на агарозной матрице посредством комплексного эпок-
си[циклогексил]С
60
-фуллеренового спейсера. В данной работе впервые используется фулле-
реновая наноструктура для оптимизации белок-порфиринового узнавания при аффинном 
связывании (рис.1). 
Был синтезирован лиганд, который иммобилизовали на ОН-группах агарозы (Sepharose 
CL-4B, Bio-Rad) через циклогексильный остаток обычным методом эпоксиактивации с кон-
тролем методами газовой хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией, после чего из-
меряли силу аффинного взаимодействия по известной методике. Митохондрии изолировали 
из миокарда крыс линии Wistar Albino Glaxo, затем фракцию внешних мембран очищали. 
Полученные образцы лиофилизовали и перед введением в колонку растворяли в фосфатном 
буферном растворе. Использовали колонку размером 1.7х52 см, для определения концентра-
ции белка применяли калориметрический метод, для характеристики гетерогенности выде-
ленных белковых фракций проводили блочный гель-электрофорез в 0.25% ДДС-12% ПААГ. 
На рис. 2 видно, что выделенная фракция ПСБ представляет собой мономолекулярный белок 
с М~17 кДа. Белковые или пептидные примеси обнаружены не были. 
C
11-17

Download 5,84 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   207   208   209   210   211   212   213   214   ...   318




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish